E-鈣粘蛋白基因啟動(dòng)子區(qū)多態(tài)性與子宮頸癌的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：E-鈣粘蛋白（E-cadherin，CDH1）是鈣粘蛋白家族中的一個(gè)成員，與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。該基因具有高度多態(tài)性，其啟動(dòng)子區(qū)及非編碼區(qū)存在的多態(tài)性位點(diǎn)可通過(guò)調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄或蛋白表達(dá)水平而影響腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。本研究旨在探討該基因啟動(dòng)子區(qū)-160C/A和-347G/GA單核苷酸多態(tài)性（single nucleotide polymorphism，SNP）與中國(guó)北方人子宮頸鱗狀細(xì)胞癌（cervical cancer）的關(guān)系。

2、>　　 方法：采用基于醫(yī)院的病例.對(duì)照研究方法，收集243例腫瘤患者和323例健康對(duì)照個(gè)體的靜脈抗凝血5ml，同時(shí)記錄其病史、個(gè)人史、腫瘤家族史。以蛋白酶K消化-飽和氯化鈉鹽析法提取外周血白細(xì)胞DNA，采用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性（polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism，PCR-RFLP）方法檢測(cè)CDH1基因的兩種多態(tài)性基因型。

3、r>　　 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS11.5版軟件包（SPSS Company，Chicago，Illinois，USA）進(jìn)行，P<0.05認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。比較基因型頻率觀察值與預(yù)期值并用X2檢驗(yàn)進(jìn)行Hardy-Weinberg平衡分析。CDH1基因型及等位基因型分布在病例組與對(duì)照組中的分布比較采用行×列表X2檢驗(yàn)。單體型頻率及連鎖不平衡分析采用EH軟件和2LD軟件（1.2version，Rockefeller University，

4、New York）。以非條件Logistic回歸法計(jì)算表示相對(duì)風(fēng)險(xiǎn)度的比值比（odds ratio，OR）及95％可信區(qū)間（confidence interval，CI）（年齡作校正）。
　　 結(jié)果：
　　 1對(duì)照組CDH1基因-160C/A、-347G/GA兩個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)的基因型頻率分布均符合Hardy-Weinberg平衡（P=0.80，P=0.38）。
　　 2 CDH1基因-347G/GA多態(tài)3種基因型頻

5、率（G/G、G/GA、GA/GA）在子宮頸癌組和對(duì)照組中分別是46.5％、38.7％、14.8％和54.2％、39.3％、6.5％，兩組比較有顯著性差異（P=0.004）；CDH1基因-347G/GA多態(tài)的等位基因頻率（G、GA）在子宮頸癌組和對(duì)照組中分別是65.8％、34.2％和73.8％、26.2％，子宮頸癌組的GA等位基因頻率（34.2％）明顯高于對(duì)照組（26.2％），兩組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.004），與G等位基因比較，攜帶

6、GA等位基因可能增加子宮頸癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)（OR=2.66，95％CI=1.46～4.78）。與G/G基因型比較，攜帶GA等位基因的基因型（G/GA+GA/GA）有增加子宮頸癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的趨勢(shì)，OR值為1.36（95％CI=0.97～1.89）。以臨床分型分層分析發(fā)現(xiàn)，攜帶GA等位基因的基因型（G/GA+GA/GA）可以明顯增加空洞型子宮頸癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)（OR=2.53，95％CI=1.00～6.38），以腫瘤大小分層分析發(fā)現(xiàn)，攜帶GA等位基

7、因的基因型（G/GA+GA/GA）有增加腫瘤直徑>6cm子宮頸癌的趨勢(shì)（OR=1.74，95％CI=0.96～3.16），與臨床分期及療效無(wú)關(guān)。
　　 3 CDH1基因-160C/A多態(tài)的基因型和等位基因頻率在子宮頸癌組和對(duì)照組中分布無(wú)顯著性差異（P=0.31和P=0.15）。與C/C基因型比較，C/A+A/A基因型可能與子宮頸癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)無(wú)關(guān)（OR=1.25，95％CI=0.89～1.76）。以臨床分期分層分析發(fā)現(xiàn)，C/A+A

8、/A基因型有增加早期子宮頸癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的趨勢(shì)（OR=1.45，95％CI=0.98～1.95）。以臨床分型、腫瘤大小和治療結(jié)束時(shí)療效評(píng)價(jià)分層分析，CDH1基因-160C/A多態(tài)的基因型頻率在各組間分布也均未發(fā)現(xiàn)顯著性差異（P值均大于0.05）。
　　 4對(duì)CDH1基因-160C/A和-347G/GA兩個(gè)SNP位點(diǎn)進(jìn)行聯(lián)合分析顯示，-160C/-347G單體型是人群中最常見(jiàn)的，占59.7％，4種單體型（-160C/-347G、-1

9、60C/-347GA、-160A/-347G和-160A/-347GA）頻率在子宮頸癌組與對(duì)照組中分布有顯著性差異（P=0.01）。另外發(fā)現(xiàn)，CDH1-160C等位基因和-347G等位基因存在連鎖不平衡現(xiàn)象（D’=0.79，SD=0.07）。
　　 5 CDH1基因-347G/GA多態(tài)3種基因型頻率（G/G、G/GA、GA/GA）在子宮頸癌患者HPV16，18型感染陽(yáng)性組和陰性組中分別是44.7％、39.2％、16.1％和61.

10、5％、34.6％、3.8％，分布無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.09）；與G/G基因型比較，攜帶GA等位基因的基因型（G/GA+GA/GA）與HPV16.18型感染無(wú)關(guān)，OR值為1.98（95％CI=0.86～4.56）。
　　 6 CDH1基因-160C/A多態(tài)的基因型在HPV-16、18型感染陽(yáng)性組及陰性組中分布無(wú)顯著性差異（P=0.72）。與C/C基因型比較，C/A+A/A基因型可能與HPV-16、18型感染無(wú)關(guān)（OR=0.81，9

11、5％CI=0.39～1.84）。
　　 結(jié)論：
　　 1 CDH1基因-160C/A的基因多態(tài)性可能與宮頸癌的易感性無(wú)關(guān)。
　　 2 攜帶CDH1基因-347GA等位基因的基因型可能增加宮頸癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。
　　 3 CDH1基因-160C/A和-347G/GA SNPs與HPV-16、18型的感染無(wú)關(guān)。
　　 4 CDH1基因-160C/A和-347G/GA SNP位點(diǎn)存在明顯的連鎖關(guān)系。且-16