當(dāng)歸揮發(fā)油對(duì)兔十二指腸平滑肌的作用及有效組分篩選研究.pdf

1、目的：
　　 1)通過動(dòng)物離體平滑肌實(shí)驗(yàn)測(cè)試分析系統(tǒng)，觀察當(dāng)歸揮發(fā)油對(duì)兔十二指腸平滑肌的作用，并對(duì)其作用機(jī)制進(jìn)行探討；2)以正交設(shè)計(jì)法研究分析當(dāng)歸揮發(fā)油不同組分對(duì)兔十二指腸平滑肌的作用及交互影響，對(duì)當(dāng)歸揮發(fā)油影響兔十二指腸平滑肌的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)進(jìn)行研究。
　　 方法：
　　 用生物機(jī)能信號(hào)采集放大系統(tǒng)、生物張力傳感器和離體平滑肌灌流裝置組建離體平滑肌實(shí)驗(yàn)測(cè)試分析系統(tǒng)，研究分析：1)當(dāng)歸揮發(fā)油對(duì)兔十二指腸平滑肌自主收

2、縮的影響；2)當(dāng)歸揮發(fā)油對(duì)Ach誘導(dǎo)兔十二指腸平滑肌收縮的影響；3)當(dāng)歸揮發(fā)油對(duì)CaCl2誘導(dǎo)兔十二指腸平滑肌收縮的影響；4)當(dāng)歸揮發(fā)油對(duì)高鉀誘導(dǎo)細(xì)胞去極化致十二指腸平滑肌張力變化的影響；5)當(dāng)歸揮發(fā)油對(duì)平滑肌收縮過程細(xì)胞內(nèi)Ca2+釋放的影響；6 )當(dāng)歸揮發(fā)油對(duì)十二指腸平滑肌收縮過程細(xì)胞外Ca2+內(nèi)流的影響。通過上述指標(biāo)就當(dāng)歸揮發(fā)油對(duì)兔十二指腸平滑肌的作用進(jìn)行研究，并對(duì)其作用機(jī)制進(jìn)行初步探討。
　　 采用酸堿萃取法，對(duì)當(dāng)歸揮發(fā)油

3、的不同組分進(jìn)行分離，按當(dāng)歸揮發(fā)油中各組分含量比，采用L8(27)正交設(shè)計(jì)，通過離體平滑肌實(shí)驗(yàn)測(cè)試分析系統(tǒng)觀察當(dāng)歸揮發(fā)油不同組分對(duì)兔十二指腸平滑肌自主收縮和Ach誘導(dǎo)十二指腸平滑肌收縮的影響，對(duì)各組分之間的交互作用進(jìn)行分析，對(duì)當(dāng)歸揮發(fā)油影響兔十二指腸平滑肌作用的物質(zhì)基礎(chǔ)進(jìn)行研究。
　　 結(jié)果：
　　 當(dāng)歸揮發(fā)油對(duì)兔離體十二指腸平滑肌自主收縮具有明顯抑制作用，可濃度依賴性壓低收縮張力，在1.1×10-6～1.1×10-4 g

4、?mL-1濃度范圍內(nèi)呈明顯的量效關(guān)系；當(dāng)歸揮發(fā)油對(duì)Ach誘導(dǎo)兔離體十二指腸平滑肌收縮具有明顯抑制作用，可濃度依賴性壓低兔離體十二指腸收縮張力，呈明顯的量效關(guān)系，3.5×10-5 g?mL-1濃度的當(dāng)歸揮發(fā)油與1.0×10-8 mol?L-1的硫酸阿托品作用相當(dāng)；當(dāng)歸揮發(fā)油對(duì)無鈣條件下Ca2+誘導(dǎo)的兔十二指腸平滑肌收縮過程具有明顯抑制作用，可濃度依賴性壓低收縮張力，3.5×10-5 g?mL-1濃度的當(dāng)歸揮發(fā)油與1.0×10-6 mol?

5、L-1的鹽酸維拉帕米作用相當(dāng)；當(dāng)歸揮發(fā)油對(duì)無鈣條件下Ach誘導(dǎo)的十二指腸平滑肌的收縮以及Ach誘導(dǎo)內(nèi)鈣釋放基礎(chǔ)上CaCl2導(dǎo)致的十二指腸平滑肌收縮呈現(xiàn)明顯拮抗作用，3.5×10-5 g?mL-1濃度當(dāng)歸揮發(fā)油作用明顯強(qiáng)于1.0×10-7 mol?L-1的鹽酸維拉帕米；當(dāng)歸揮發(fā)油對(duì)高鉀去極化誘導(dǎo)的兔十二指腸平滑肌收縮具有明顯抑制作用，可濃度依賴性壓低收縮張力，呈明顯的量效關(guān)系，3.5×10-5 g?mL-1濃度當(dāng)歸揮發(fā)油作用明顯強(qiáng)于1.0

6、×10-7 mol?L-1的鹽酸維拉帕米。
　　 以L8(2 7)正交設(shè)計(jì)分析當(dāng)歸揮發(fā)油各組分對(duì)兔十二指腸平滑肌的影響，結(jié)果顯示，中性非酚性組分(A3)是抑制兔十二指腸平滑肌收縮的主要因素，且作用與總揮發(fā)油(AN)相當(dāng)；酸性組分(A1)、酚性組分(A2)和A3對(duì)兔離體十二指腸平滑肌的作用無明顯交互影響。 A1、A2、A3各組分以1：1：1比例加藥，對(duì)各組分影響平滑肌的絕對(duì)作用強(qiáng)度進(jìn)行分析。結(jié)果顯示當(dāng)歸揮發(fā)油A1、A2、A3各組分

7、對(duì)兔十二指腸平滑肌收縮均有明顯抑制作用，其中以A3作用較顯著，但各組分之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)論：
　　 1)當(dāng)歸揮發(fā)油對(duì)兔離體十二指腸平滑肌自主收縮和Ach誘導(dǎo)兔離體十二指腸收縮具有明顯抑制作用；該作用可能與阻滯受體控制型鈣通道(ROCC)或電壓依賴性鈣通道(VDCC)、影響兔十二指腸平滑肌收縮過程中細(xì)胞外Ca2+內(nèi)流和細(xì)胞內(nèi)Ca2+釋放過程有關(guān)。
　　 2)當(dāng)歸揮發(fā)油A1、A2、A3對(duì)兔離體十二指腸平