鋅、鐵及其聯(lián)合干預(yù)對(duì)慢性疲勞大鼠影響研究.pdf

1、目的:通過(guò)建立慢性疲勞綜合征(Chronic Fatigue Syndrome,CFS)大鼠模型，觀察鋅、鐵及其聯(lián)合干預(yù)對(duì)CFS大鼠的影響，并對(duì)其發(fā)生機(jī)制進(jìn)行初步的探討，為今后CFS的深入研究提供參考依據(jù)。
　　方法:采用睡眠剝奪與負(fù)重力竭游泳的方法建立雄性SD（Sprague Dawley）大鼠CFS模型；采用行為學(xué)指標(biāo)（包括力竭游泳時(shí)間、懸尾時(shí)間及水迷宮時(shí)間）結(jié)合大鼠一般形態(tài)變化分值作為CFS模型建立成功的判定標(biāo)準(zhǔn)；待模型建立

2、判定成功后，選用鋅(葡萄糖酸鋅30mg/kg.d)、鐵(七水硫酸亞鐵30mg/kg.d)及其聯(lián)合(葡萄糖酸鋅30mg/kg.d+七水硫酸亞鐵30mg/kg.d)對(duì)CFS大鼠進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)干預(yù)；干預(yù)后，通過(guò)負(fù)重力竭游泳實(shí)驗(yàn)、懸尾實(shí)驗(yàn)、水迷宮實(shí)驗(yàn)進(jìn)行行為學(xué)測(cè)定；應(yīng)用稱重法測(cè)定脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)；應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）測(cè)定血清白介素-2（IL-2，Interleukin-

3、2）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α，tumor necrosis factor-α）;應(yīng)用黃嘌呤氧化酶法測(cè)定肝臟超氧化物歧化酶（SOD，Superoxide Dismutase）活力；應(yīng)用ICP-OES光譜法測(cè)定血清鋅(Zn,zinc)含量及鐵(Fe，iron)含量；采用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)IL-2、TNF-α在脾臟中的表達(dá)，運(yùn)用圖像處理系統(tǒng)對(duì)結(jié)果加以定性分析。
　　結(jié)果：模型組大鼠一般形態(tài)及行為均出現(xiàn)改變，產(chǎn)生了CFS狀態(tài)，大鼠模

4、型建立成功；干預(yù)結(jié)束后，經(jīng)測(cè)定各組大鼠血清鋅、鐵含量分別為：陰性組（2.60±0.65ug/ml、9.94±3.77ug/ml），陽(yáng)性組（1.44±0.17ug/ml、4.03±1.30ug/ml），鋅干預(yù)組（2.69±0.54ug/ml、9.54±2.08ug/ml），鐵干預(yù)組（2.27±0.30ug/ml、12.71±8.82ug/ml），聯(lián)合干預(yù)組（2.63±2.09ug/ml、10.24±10.73ug/ml）；鋅干預(yù)組、鐵干預(yù)

5、組大鼠平均體重低于陰性組大鼠，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；鋅、鐵及聯(lián)合干預(yù)組大鼠平均體重均高于陽(yáng)性組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05，P＜0.05，P＜0.01）。在力竭游泳實(shí)驗(yàn)中，鋅、鐵及聯(lián)合干預(yù)組力竭游泳時(shí)間均高于陰性組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；以陽(yáng)性組為對(duì)照時(shí)，鋅、鐵及聯(lián)合干預(yù)組力竭游泳時(shí)間均高于陽(yáng)性組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01，P＜0.01，P＜0.05）；以鋅干預(yù)組為對(duì)照組時(shí)，鐵干預(yù)組及聯(lián)合干預(yù)組力竭

6、游泳時(shí)間均低于鋅干預(yù)組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；鋅、鐵在CFS大鼠力竭游泳時(shí)間上有交互作用（P＜0.01），表現(xiàn)為拮抗。在懸尾實(shí)驗(yàn)中，陽(yáng)性組懸尾時(shí)間低于陰性組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；以陽(yáng)性組為對(duì)照時(shí)，鋅干預(yù)組、鐵干預(yù)組及聯(lián)合干預(yù)組懸尾時(shí)間均高于陽(yáng)性組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；鋅、鐵在CFS大鼠懸尾時(shí)間上有交互作用（P＜0.05），表現(xiàn)為拮抗。Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)中，陽(yáng)性組、鐵干預(yù)組水迷宮時(shí)間均高于陰性組

7、，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01，P＜0.05）；以陽(yáng)性組為對(duì)照時(shí)，鋅、鐵及聯(lián)合干預(yù)組水迷宮時(shí)間均低于陽(yáng)性組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；鋅、鐵在CFS大鼠水迷宮時(shí)間上有交互作用（P＜0.01），表現(xiàn)為拮抗。在血清鋅的測(cè)定中，陽(yáng)性組大鼠血清鋅水平低于陰性組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；以陽(yáng)性組為對(duì)照時(shí)，鋅干預(yù)組、聯(lián)合干預(yù)組血清鋅水平均高于陽(yáng)性組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01，P＜0.05）。在血清鐵的測(cè)定中，陽(yáng)性組大鼠血

8、清鐵水平低于陰性組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；以陽(yáng)性組為對(duì)照時(shí)，鐵干預(yù)組、聯(lián)合干預(yù)組血清鐵水平高于陽(yáng)性組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01，P＜0.05）。脾臟指數(shù)的測(cè)定中，陽(yáng)性組脾臟指數(shù)低于陰性組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；以陽(yáng)性組為對(duì)照時(shí)，鋅、鐵及聯(lián)合干預(yù)組大鼠脾臟指數(shù)均高于陽(yáng)性組，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。胸腺指數(shù)的測(cè)定中，陽(yáng)性組、鋅干預(yù)組、鐵干預(yù)組胸腺指數(shù)均低于陰性組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；以

9、陽(yáng)性組為對(duì)照時(shí)，鋅干預(yù)組、鐵干預(yù)組及聯(lián)合干預(yù)組胸腺指數(shù)均高于陽(yáng)性組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；以聯(lián)合干預(yù)組為對(duì)照時(shí)，鋅干預(yù)組及鐵干預(yù)組胸腺指數(shù)均低于聯(lián)合干預(yù)組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。在血清IL-2的測(cè)定中，陽(yáng)性組IL-2水平低于陰性組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；以陽(yáng)性組為對(duì)照時(shí)，鋅、鐵及聯(lián)合干預(yù)組IL-2水平高于陽(yáng)性組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。在血清TNF-α的測(cè)定中，陽(yáng)性組TNF-α水平高于陰性組

10、，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；以陽(yáng)性組為對(duì)照時(shí)，鋅、鐵及聯(lián)合干預(yù)組的血清TNF-α水平均低于陽(yáng)性組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；鋅、鐵在CFS大鼠血清TNF-α水平上有交互作用（P＜0.05），表現(xiàn)為拮抗。在肝組織勻漿總SOD活力的測(cè)定中，陽(yáng)性組、鋅干預(yù)組、聯(lián)合干預(yù)組SOD活力低于陰性組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01，P＜0.05，P＜0.05）；以陽(yáng)性組為對(duì)照時(shí)，鋅干預(yù)組、鐵干預(yù)組及聯(lián)合干預(yù)組SOD活力均高于陽(yáng)性組，差

11、異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；鋅、鐵在CFS大鼠SOD活力上有交互作用（P＜0.05），表現(xiàn)為拮抗。免疫組化脾臟IL-2、TNF-α測(cè)定實(shí)驗(yàn)中，以陽(yáng)性組為對(duì)照，陰性組、鐵干預(yù)組、鋅干預(yù)組及聯(lián)合干預(yù)組IL-2表達(dá)上調(diào)而TNF-α表達(dá)下調(diào)。
　　結(jié)論：通過(guò)睡眠剝奪及負(fù)重力竭游泳法能較好地模擬CFS發(fā)生因素，成功建立CFS大鼠模型；鋅、鐵及其聯(lián)合干預(yù)均能提高CFS大鼠的體力、改善其學(xué)習(xí)記憶能力、提高其抗氧化能力、增強(qiáng)其免疫功能；鋅鐵在