CREB3對結直腸癌轉移的影響及其機制.pdf

1、背景:結直腸癌(Colorectal cancer，CRC)患者的死亡率很高，而轉移是結直腸癌患者死亡的主要原因。目前沒有任何測試或生物標志物能精確地預測腫瘤的侵襲和轉移。因此，提高預測侵襲轉移的手段是十分有必要的，鑒定生物標志物，監(jiān)測結直腸癌的轉移將使醫(yī)療個性化，提高癌癥患者的存活率。CREB3(也稱Luman或LZIP)是CREB3亞家族轉錄因子的原型，是一種bZIP轉錄因子，它不僅參與了內質網(wǎng)應激和未折疊蛋白反應，而且還在許多生物

2、學過程，包括細胞遷移以及癌變中起到至關重要的作用。CREB3能與轉錄共激活子HCF1，丙型肝炎病毒核心蛋白，CC趨化因子受體，和樹突狀細胞特異性跨膜蛋白相互作用。還有研究指出CREB3可能與乳腺癌細胞、宮頸癌細胞的轉移密切相關。本實驗旨在研究與結直腸癌浸潤轉移相關的生物標志物，提高預測結直腸癌侵襲轉移的手段。
　　方法:(1)用表達譜芯片檢測結直腸癌FFPE組織中mRNA表達譜的差異。(2)采用原位雜交技術和免疫組織化學技術對芯片

3、結果進行驗證。(3)QPCR檢測三株結直腸癌細胞（分別為HCT116、SW620和SW480）中CREB3的表達。(4) Transwell法檢測三株結直腸癌細胞的遷移能力。(5)免疫細胞化學對SW480細胞中的CREB3進行定位。(6) QPCR法檢測三株結直腸癌細胞中轉移相關基因的表達如:TWIST1、β-catenin、MMP9和MMP2。(7)siRNA法瞬時干擾SW480細胞中的CREB3后，QPCR檢測轉移相關基因(TWIS

4、T1、β-catenin、MMP9、MMP2)的表達。
　　結果:(1)芯片結果顯示，有遠處轉移結直腸癌患者的轉移癌灶中，CREB3的表達明顯高于其原發(fā)癌灶;在復發(fā)患者的復發(fā)癌灶中，CREB3的表達明顯高于其原發(fā)癌灶。(2)原位雜交技術和免疫組織化學結果顯示轉移組患者原發(fā)灶和癌旁組織中的CREB3表達明顯高于無轉移組患者的原發(fā)灶和癌旁組織。(3) QPCR結果顯示三株結直腸癌細胞中SW480細胞中CREB3的表達最高。(4)三株結

5、直腸癌細胞中SW480細胞的遷移能力最強。(5)免疫細胞化學結果顯示在SW480細胞中CREB3主要表達在胞漿，少量表達在胞核。(6) QPCR顯示三株結直腸癌細胞中與轉移相關的幾個基因如β-catenin、MMP9和MMP2在SW480細胞中的表達最高，趨勢與CREB3相同。(7)瞬時干擾SW480細胞中的CREB3后，QPCR結果顯示MMP2的表達顯著下降，Twist1、β-catenin和MMP9的表達無明顯變化。
　　結論