堿茅Put-R40g3基因在逆境脅迫下的功能解析.pdf

1、當(dāng)前，鹽堿地面積的不斷擴大對農(nóng)牧業(yè)生產(chǎn)和農(nóng)業(yè)經(jīng)濟的繁榮都產(chǎn)生了嚴重的影響，因此對鹽堿地資源的開發(fā)和利用有著極其重要的現(xiàn)實意義。
　　本論文以這一現(xiàn)狀為研究背景，采用堿茅(Puccinellia tenuiflora)作為試驗材料，從堿茅cDNA文庫中分離得到Put-R40g3基因(登錄號:AB465547)?？寺〉腸DNA全長為869bp，其編碼的蛋白質(zhì)共有195個氨基酸，與水稻、小麥和擬南芥的R40g3蛋白的氨基酸序列有較高的同

2、源性。對經(jīng)逆境處理的堿茅幼苗根、葉中該基因的表達分析結(jié)果表明，堿茅中Put-R40g3基因的表達有被ABA、鹽(NaCl、Na2CO3、 NaHCO3)和干旱誘導(dǎo)的趨勢。這個結(jié)果預(yù)示了Put-R40g3基因與逆境存在密切關(guān)系
　　利用與植物有類似代謝途徑的單細胞真核生物——酵母作為模型來研究Put-R40g3蛋白在細胞內(nèi)的位置及其在真核細胞中表達時所呈現(xiàn)出來的抗逆性。Put-R40g3蛋白與綠色熒光蛋白(GFP)融合在酵母細胞表達

3、的蛋白質(zhì)定位研究結(jié)果表明了Put-R40g3蛋白存在于細胞質(zhì)中。同時Put-R40g3基因在酵母中表達，使酵母在鹽(NaCl、Na2CO3、NaHCO3)、干旱及氧化逆境條件下提高了對逆境的適應(yīng)能力。
　　在轉(zhuǎn)基因擬南芥中，對獲得的能夠穩(wěn)定表達Put-R40g3基因的轉(zhuǎn)基因株系進行鹽和干旱脅迫，結(jié)果顯示轉(zhuǎn)基因株系在逆境下的生根情況要優(yōu)于野生型擬南芥。此外，轉(zhuǎn)基因株系生長發(fā)育的形態(tài)有異于野生型，會在莖部或底部生長出一個或多個柄。這個