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文檔簡介
1、堿茅(Puccinellia tenuifolra)是一種廣泛分布于我國東北部平原鹽堿地的多年生草本植物,屬于禾本科堿茅屬,其適應(yīng)性極強,能在極其惡劣的鹽堿化土壤生長,甚至在堿斑周圍也能正常生長。對于堿茅這種特殊的野生耐鹽植物具有潛在的抗逆性相關(guān)基因資源,本研究是應(yīng)用了新型的功能基因選擇性篩選技術(shù)FOX hunting system首次通過模式生物酵母對其進行研究。通過構(gòu)建堿茅全長cDNA基因文庫,連接到大腸桿菌-酵母穿梭型表達(dá)載體pA
2、UR101上,轉(zhuǎn)化到酵母菌株InVscI中,并對轉(zhuǎn)化得到的堿茅全長cDNA酵母文庫進行了非生物脅迫的篩選和分析。根據(jù)研究目的選擇了對堿茅全長cDNA酵母文庫進行耐NaCl鹽脅迫篩選,初步分析獲得的56個堿茅cDNA酵母菌株,確定主要研究其中的耐NaCl鹽脅迫性較強的堿茅cDNA酵母菌株15個。通過進一步對這15個堿茅cDNA酵母菌株耐NaCl鹽脅迫、NaHCO3鹽脅迫和耐Mannitol干旱脅迫分析,發(fā)現(xiàn)在不同脅迫逆境和不同脅迫濃度梯度
3、下,獲得的15個堿茅cDNA酵母菌株都表現(xiàn)出一定的耐受性,生長狀況相互有差異,但均好于空載酵母菌株對照的生長狀態(tài)。
克隆15個堿茅cDNA酵母菌株所攜帶的堿茅全長cDNA,獲得了其中10個。對這10個堿茅cDNA進行測序,并與模式植物的已知基因的同源性做比對,發(fā)現(xiàn)其中9個菌株所攜帶的基因均是新發(fā)現(xiàn)的基因,且基因功能未知。
菌株Y011中攜帶的基因全長1162bp,包含的開放閱讀框架(ORF)長為756bp,編
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