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
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文檔簡介
1、第一部分:
目的:觀察兒科重癥監(jiān)護病房(Pediatric intensive care unit,PICU)機械通氣(mechanical ventilation,MV)患兒氣管導管(endotracheal tube,ETT)內(nèi)壁細菌生物膜(biofilm,BF)內(nèi)細菌分布情況及BF形態(tài)學特征。
方法:以我院治療的35例MV患兒為研究對象。收集第一次拔除的ETT,經(jīng)碘化丙啶(PI)和異硫氰酸熒光素標記刀豆
2、蛋白A(FITC-ConA)染色后,激光共聚焦顯微鏡(Confocal Laser Canning Microscopy,CLSM)觀察ETT-BF內(nèi)細菌及胞外多糖(extracellular polymericsubstances,EPS)分布情況,并收集ETT和下呼吸道分泌物進行細菌分離、培養(yǎng)和鑒定。
結果:(1)35例MV患兒中,ETT表面培養(yǎng)陽性31例(88.57%);17例ETT表面和下呼吸道分泌物同時分離出相同
3、菌種,占ETT培養(yǎng)陽性的54.83%。在ETT-BF和下呼吸道分泌物中以金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、大腸埃希菌、陰溝腸桿菌最常見。
(2)CLSM觀察可見,氣管插管12h后,ETT表面己出現(xiàn)細菌粘附;48h時ETT表面可見大量短棒狀或球狀細菌粘附聚集,EPS較12h時顯著增多,初步形成BF結構;72h左右細菌粘連成團塊狀,被EPS包裹,可見成熟BF結構形成;7天后細菌粘連成大片狀,在其周圍可見散在的微菌落。
4、 (3)35例MV患兒中,19例發(fā)生了呼吸機相關性肺炎(Ventilated-associated Pneumonia,VAP),其中經(jīng)口插管10例(62.5%),經(jīng)鼻插管9例(100%),但差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
結論:MV時細菌極易在ETT表面粘附,形成細菌BF。ETT內(nèi)壁細菌定植及BF形成與長時間MV患兒伴發(fā)呼吸機相關性肺炎之間可能存在一定相關性。
第二部分:
目的:探討氣囊導
5、尿管機械清理法對機械通氣(mechanicalventilation,MV)患兒氣管導管(endotracheal tube,ETT)內(nèi)壁細菌生物膜(biofilm,BF),形成的干預作用。
方法:采用前瞻性、隨機、對照設計,將MV患兒90例按體外循環(huán)下行先天性心臟病直視手術(體外循環(huán)組)和肺炎兩病種隨機分為氣囊導尿管機械清理組(每天3次為A組、每天2次為B組)和對照組(C組)。平板菌落計數(shù)法計算ETT-BF細菌菌落數(shù);P
6、I/FITC-ConA染色后,CLSM觀察ETT-BF結構以及生物膜厚度的變化;比較3組ETT和下呼吸道分泌物細菌菌種的變化及入住ICU時間、MV時間、呼吸機相關性肺炎(Ventilator-associated Pneumonia,VAP)發(fā)生情況。
結果:(1)菌落計數(shù):①體外循環(huán)組:A組ETT-BF細菌菌落計數(shù)較C組顯著減少(P<0.05),B和C組ETT-BF細菌菌落計數(shù)在MV0~2d時差異不顯著,但隨著MV時間延
7、長,其菌落計數(shù)差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);②肺炎組:A、B組ETT-BF細菌菌落計數(shù)較C組顯著減少(P<0.05)。
(2)細菌培養(yǎng)陽性率:①體外循環(huán)組和肺炎組中A、B組下呼吸道分泌物培養(yǎng)陽性率較C組顯著降低,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),且下呼吸道分泌物菌種主要以正常菌群為主;②體外循環(huán)組和肺炎組中A、B組ETT培養(yǎng)陽性率較C組降低,但差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
(3)CLSM觀察,C組可
8、見發(fā)出綠色熒光的云霧狀的EPS將紅色的細菌包裹,形成具有一定厚度的成熟的BF,A組僅見零散分布染成紅色的細菌,未見BF形成;B組細菌數(shù)量較A組多,可見少量的綠色熒光。BF厚度:體外循環(huán)組C組中1d,3d,7d亞組分別為26.73±3.52pan,37.43±4.86μm,43.51±2.30μm,BF厚度隨MV時間的增加而增加,差異有顯著性(P<0.05);A、B組BF厚度較C組均顯著變薄(P<0.05),以A組效果更明顯,且A組和B組
9、之間BF厚度差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。肺炎組經(jīng)氣囊導尿管機械清理后A、B組BF厚度均顯著變薄(P<0.05)趨勢同體外循環(huán)組。
(4)體外循環(huán)組和肺炎組中A、B組VAP發(fā)生率與C組差異有統(tǒng)計學意義,三組患兒入住ICU時間、MV時間差異不顯著,但A、B組入住ICU時間、MV時間有減少的趨勢,A組更明顯。
結論:氣囊導尿管機械清理法可有效的清除氣管導管內(nèi)分泌物、延緩和阻止ETT-BF的形成,降低VAP的發(fā)
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