植物源細(xì)菌群體感應(yīng)抑制因子的篩選及其對生物膜形成的影響.pdf

1、長期以來，人們認(rèn)為細(xì)菌之間彼此孤立，互不聯(lián)系，但近幾年的研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)菌世界也和人類世界一樣，它們也擁有自己的“語言”，這種信號分子被稱為信號分子，細(xì)菌細(xì)胞產(chǎn)生信號分子并釋放到環(huán)境中去，當(dāng)環(huán)境中的信號分子達(dá)到一定濃度后開啟細(xì)胞密度依賴的特定基因的表達(dá)，這一現(xiàn)象被稱為“群體感應(yīng)”（quorum sengsing，QS），它是細(xì)菌根據(jù)細(xì)胞密度變化進(jìn)行基因表達(dá)調(diào)控的一種生理行為。研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)菌通過群體感應(yīng)系統(tǒng)調(diào)控致病過程的一些重要環(huán)節(jié)，如致病因

2、子產(chǎn)生、生物膜形成等。
　　 微生物是導(dǎo)致食品腐敗和感染的主要因素，而且只有腐敗細(xì)菌或致病細(xì)菌達(dá)到一定數(shù)量后才能導(dǎo)致食品的腐敗和致病性的發(fā)生。隨著抗菌藥物和防腐劑的廣泛應(yīng)用，細(xì)菌的耐藥性變得越來越嚴(yán)重，已成為全球關(guān)注的危害人類健康的重大難題。近年來，AHLs介導(dǎo)的群體感應(yīng)現(xiàn)象如何影響食品的品質(zhì)以及與食品腐敗和致病菌致病性的關(guān)系成為食品防腐保鮮和致病菌防治領(lǐng)域的一個(gè)新的研究熱點(diǎn)。因此，細(xì)菌群體感應(yīng)系統(tǒng)干擾的研究對于新型防腐劑和抗菌

3、藥物的研究與開發(fā)具有重要意義。
　　 本研究以革蘭氏陰性菌的?；呓z氨酸內(nèi)酯介導(dǎo)的群體感應(yīng)系統(tǒng)為靶標(biāo)，從植物材料中篩選群體感應(yīng)抑制因子，并研究其對大腸桿菌ATCC8099產(chǎn)生物膜能力的抑制作用，為研究、開發(fā)新型抗菌藥物和防腐劑提供理論依據(jù)和技術(shù)支持。具體研究如下：
　　 1、植物源群體感應(yīng)抑制因子的篩選
　　 本研究利用產(chǎn)紫色素的菌株，Chromobacterium violaceum026（CV026），進(jìn)行群

4、體感應(yīng)抑制劑檢測，其紫色素的產(chǎn)生受信號分子acylated lactone（AHL）的調(diào)控。采用平板檢測法，研究了34種香辛料及花茶提取物對Chromobacterium violaceum026（CV026）產(chǎn)紫色能力的抑制作用及生長的影響，從中篩選出薰衣草和玫瑰花提取物具有干擾Chromobacterium violaceum026（CV026）群體感應(yīng)系統(tǒng)的作用，且不影響Chromobacterium violaceum026（C

5、V026）的生長。
　　 2、薰衣草和玫瑰花提取物群體感應(yīng)抑制效應(yīng)的研究
　　 本部分采用不同的提取方式，采用定性和定量兩種方法研究薰衣草和玫瑰花提取物對Chromobacterium violaceum026（CV026）群體感應(yīng)系統(tǒng)的抑制作用，提取溶劑采用有機(jī)溶劑和水，結(jié)果表明薰衣草以乙酸乙酯作為提取溶劑，提取時(shí)間為24h效果最好。玫瑰花以水作為提取溶劑，提取方式為超聲波處理1h效果最好。并研究其在不同濃度下對Chr

6、omobacterium violaceum026（CV026）產(chǎn)紫色素能力的影響，發(fā)現(xiàn)抑制作用與提取物濃度呈明顯的量效關(guān)系。
　　 3、薰衣草和玫瑰花提取物對大腸桿菌產(chǎn)生物膜能力的影響
　　 本部分以產(chǎn)生物膜的菌株大腸桿菌ATCC8099為研究基礎(chǔ)，以薰衣草乙酸乙酯提取物和玫瑰花超聲波處理1h的水提取液為研究對象，通過定性和定量兩種方法檢測兩種提取物對大腸桿菌ATCC8099產(chǎn)生物膜能力的影響。結(jié)果表明，兩種提取物均可