降鈣素基因相關(guān)肽在創(chuàng)傷性腦損傷加速骨折愈合機(jī)制中的作用.pdf

1、背景：創(chuàng)傷性腦損傷（traumatic brain injury，TBI）后骨折愈合加速是臨床上常見的現(xiàn)象。然而，這種現(xiàn)象發(fā)生的機(jī)制至今尚未闡明。有文獻(xiàn)報(bào)道TBI發(fā)生后，血清中諸多生長(zhǎng)因子和活性多肽類物質(zhì)表達(dá)上調(diào)或下降。降鈣素基因相關(guān)肽（calcitonin gene-related peptide，CGRP）是神經(jīng)系統(tǒng)分泌的重要因子，在腦損傷后，分泌明顯增加。同時(shí)，最近研究發(fā)現(xiàn)CGRP具有較強(qiáng)的促進(jìn)成骨能力。因此，我們認(rèn)為CGRP可能

2、在TBI加速骨折愈合中具有重要作用。為驗(yàn)證創(chuàng)傷性腦損傷后血清中CGRP水平變化可加強(qiáng)骨折愈合的假設(shè)，我們通過建立標(biāo)準(zhǔn)的股骨中段閉合骨折模型及重復(fù)性好的腦損傷模型，觀察骨折愈合速度及檢測(cè)血清、腦組織和骨折周圍肌肉組織的CGRP表達(dá)變化，分析CGRP在TBI加速骨折愈合機(jī)制中的作用。
　　實(shí)驗(yàn)一新型大鼠閉合骨折模型的建立及評(píng)價(jià)
　　目的：通過制作一種打擊器，建立標(biāo)準(zhǔn)大鼠股骨閉合骨折模型。
　　方法：對(duì)Sprague-Daw

3、ley大鼠左側(cè)股骨逆行髓內(nèi)克氏針內(nèi)固定，然后使用自行設(shè)計(jì)的落體打擊器制作股骨中段閉合骨折，分別于骨折后1、4、8周處死大鼠取股骨標(biāo)本，通過X線、組織學(xué)檢查評(píng)價(jià)骨折類型、移位程度以及骨折的愈合情況。
　　結(jié)果：術(shù)后X線證實(shí)無(wú)明顯移位的橫行或短斜型骨折占總例數(shù)的86.1％。組織學(xué)檢查顯示骨折呈典型的二期愈合過程。
　　結(jié)論：通過自行設(shè)計(jì)的打擊器制作的閉合骨折符合標(biāo)準(zhǔn)閉合骨折模型的要求。
　　實(shí)驗(yàn)二創(chuàng)傷性腦損傷大鼠動(dòng)物模型及

4、其評(píng)價(jià)體系的建立
　　目的：建立一種創(chuàng)傷性腦損傷動(dòng)物模型及相關(guān)評(píng)價(jià)體系。
　　方法：應(yīng)用自行設(shè)計(jì)制造的自由落體撞擊裝置建立大鼠創(chuàng)傷性腦損傷模型，觀察大鼠腦損傷后生命體征和病理學(xué)改變，并通過神經(jīng)功能量表進(jìn)行功能評(píng)分。
　　結(jié)果：TBI后，Sprague-Dawley大鼠均出現(xiàn)明顯的生命體征改變，包括立即短暫的呼吸暫停，隨即逐漸恢復(fù)至正常呼吸頻率等。TBI后6小時(shí)，出現(xiàn)明顯的腦損傷病理改變。TBI后12小時(shí)，神經(jīng)功能量表分

5、析結(jié)果表明TBI后小腦、腦干和大腦皮質(zhì)功能顯著改變。
　　結(jié)論：本體系可用于建立和評(píng)價(jià)TBI大鼠模型。
　　實(shí)驗(yàn)三降鈣素基因相關(guān)肽在腦損傷合并骨折愈合中的作用
　　目的：通過建立標(biāo)準(zhǔn)的股骨閉合骨折模型及創(chuàng)傷性腦損傷模型，分析CGRP在TBI合并骨折愈合中的作用。
　　方法：制作Sprague-Dawley大鼠標(biāo)準(zhǔn)股骨中段閉合骨折模型，其中部分大鼠接受TBI，該閉合腦損傷和彌漫性軸索損傷患者受到損傷相似。在術(shù)后4周

6、和8周處死大鼠取材股骨，行顯微CT比較骨折愈合速度。取材不通時(shí)間點(diǎn)血清、腦組織及骨折周圍肌肉組織分別行ELISA、免疫組織化學(xué)、免疫蛋白印跡和RT-PCR檢測(cè)CGRP水平變化。
　　結(jié)果：顯微CT結(jié)果表明TBI合并骨折組骨折愈合和礦化早于單純骨折組。骨折后1周，ELISA檢測(cè)表明TBI合并骨折組血清中CGRP明顯升高（P<0.05），免疫組織化學(xué)、免疫蛋白印跡和RT-PCR分別檢測(cè)表明TBI合并骨折組表明腦組織和骨折周圍肌肉組織中