七氟烷后處理對(duì)大鼠原位灌注肺缺血再灌注損傷及ICAM-1表達(dá)的影響.pdf

1、目的：探討七氟烷后處理對(duì)大鼠原位灌注肺模型肺缺血再灌注損傷的影響及其可能的機(jī)制。
　　方法：24只雄性清潔級(jí)SD大鼠，建立原位肺灌注模型，用低鉀右旋糖酐液組（LPD液）進(jìn)行灌注。穩(wěn)定灌注15min后，大鼠隨機(jī)分為3組（n=8）：正常對(duì)照組（N組）：建立模型后穩(wěn)定灌注;缺血再灌注組（IR組）：缺血45min，再灌注120min;七氟烷后處理組（SPC組）：缺血45min，含有飽和1.0MAC七氟烷的LPD液灌注30min，再換LPD

2、液灌注90min。各組均于模型建立穩(wěn)定灌注15min記為T1，缺血45min記為T2，再灌注30min記為T3，再灌注120min記為T4時(shí)點(diǎn)。四個(gè)時(shí)點(diǎn)抽取左心引流LPD液測(cè)丙二醛（MDA），超氧化物歧化酶（SOD），T4時(shí)點(diǎn)抽取左心引流LPD液測(cè)氧分壓記為PO2，計(jì)算氧合指數(shù)（PaO2/FiO2）；留取肺組織檢測(cè)MDA，SOD，白細(xì)胞介素-1（IL-1），腫瘤壞死因子-α（TNF-α），免疫組化法觀察細(xì)胞間粘附分子-1（ICAM-1）

3、的表達(dá)；HE染色觀察肺損傷定量評(píng)價(jià)指標(biāo)（IQA），光鏡及電鏡下進(jìn)行組織形態(tài)學(xué)的觀察。
　　結(jié)果：1）基礎(chǔ)體重：N組、IR組、SPC組實(shí)驗(yàn)大鼠基礎(chǔ)體重比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。2）左心引流液PO2：N組PO2高于IR組及SPC組(p<0.05)，SPC組左心引流LPD液PO2明顯高于IR組(p<0.05)。3）氧合指數(shù):N組氧合指數(shù)高于IR組及SPC組(p<0.05)，SPC組氧合指數(shù)明顯高于IR組(p<0.05)。4）超氧化物歧化酶（SO

4、D）含量測(cè)定：N組肺組織SOD濃度顯著高于于SPC組及IR組；IR組較SPC組明顯降低。(p<0.05)左心引流LPD液T1時(shí)點(diǎn)各組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)變化；T2,T3時(shí)點(diǎn)N組SOD濃度高于SPC組及IR組（P＜0.05）；T4時(shí)點(diǎn)N組SOD濃度高于IR組及SPC組，SPC組高于IR組（P＜0.05）；組內(nèi)各時(shí)點(diǎn)間左心引流LPD液濃度與T2時(shí)點(diǎn)比較：T3，T4左心引流液中SOD濃度均低于于T1時(shí)點(diǎn)。其中T4時(shí)點(diǎn)最低。（P＜0.05）5）丙二醛(M

5、DA)含量：N組肺組織MDA含量顯著低于SPC組及IR組。SPC組較IR組明顯降低(p<0.05)。T1時(shí)點(diǎn)各組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)變化；T2,T3時(shí)點(diǎn) N組MDA濃度低于SPC組及IR組（P＜0.05）；T4時(shí)點(diǎn)N組MDA濃度低于IR組及SPC組，SPC組低于IR組（P＜0.05）；組內(nèi)各時(shí)點(diǎn)間左心引流LPD液濃度與T2時(shí)點(diǎn)比較：T3，T4左心引流液中MDA濃度均高于于T1時(shí)點(diǎn)。其中T4時(shí)點(diǎn)最低。（P＜0.05）6）肺組織內(nèi)MDA含量：N組肺組

6、織MDA含量顯著低于SPC組及IR組。SPC組較IR組明顯降低。7）免疫組化ICAM-1的表達(dá)：IR組每高倍鏡陽(yáng)性表達(dá)的細(xì)胞數(shù)較 N組、SPC組顯著增加(p＜0.01)，SPC組陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞數(shù)較 N組增加(p＜0.05)，SPC組陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞數(shù)較IR組降低(p＜0.01)。8）肺組織腫瘤壞死因子TNF的含量）：IR組較N組、SPC組顯著升高(p<0.05)；N組低于SPC組(p<0.05)。9）肺組織白細(xì)胞介素-1（IL-1）的含量）：

7、IR組升高明顯，顯著高于N組及SPC組（p<0.05）;SPC組高于N組。10）病理結(jié)果：IR組肺組織嚴(yán)重受損，正常肺泡腔結(jié)構(gòu)消失，肺間隔明顯增厚，肺泡腔內(nèi)紅細(xì)胞及炎性細(xì)胞浸潤(rùn)；SPC組及 N組肺組織受損程度明顯減輕。11）肺損傷定量評(píng)價(jià)指標(biāo)(IQA)的計(jì)算：N組損傷指數(shù)明顯低于IR，SPC兩組，SPC組的IQA顯著低于IR組(p<0.01)。12）電鏡下觀察：N組電鏡下觀察，血管內(nèi)皮細(xì)胞無(wú)腫脹，細(xì)胞核染色均勻?；|(zhì)中線粒體無(wú)腫脹，結(jié)構(gòu)

8、正常，嵴結(jié)構(gòu)較多，分布正常，嗜鋨性板層小體豐富。SPC組線粒體稍有腫脹，嵴結(jié)構(gòu)基本正常，嵴結(jié)構(gòu)可見。IR組細(xì)胞腫脹，線粒體腫脹，結(jié)構(gòu)紊亂，嵴結(jié)構(gòu)不清，嗜鋨性板層小體明顯減少。
　　結(jié)論：七氟烷后處理對(duì)肺缺血再灌注損傷起到一定的保護(hù)作用。七氟烷后處理顯著減輕肺損傷，提高肺氧合指數(shù)，改善肺的氧合功能；七氟烷后處理明顯抑制炎性介質(zhì)的表達(dá)，使細(xì)胞間粘附分子-1（ICAM-1）的表達(dá)水平降低，減輕肺組織炎癥反應(yīng)，減少肺損傷與肺組織結(jié)構(gòu)的破壞