P38MAPK抑制劑預(yù)處理和后處理對大鼠下肢缺血再灌注損傷ICAM-1、TNF-α表達(dá)的影響.pdf

1、目的:1、探討大鼠下肢缺血再灌注損傷時(shí)血清中ICAM-1及TNF-α的表達(dá)。2、探討P38MAPK抑制劑預(yù)處理和后處理對大鼠下肢缺血再灌注損傷時(shí)ICAM-1及TNF-α的影響。
　　 材料與方法:1、動(dòng)物分組及藥物處理:32只健康雄性Wistar大鼠隨機(jī)分四組:假手術(shù)組,下肢缺血再灌注組,藥物預(yù)處理組,藥物后處理組；通過開腹夾閉腹主動(dòng)脈建立大鼠下肢缺血再灌注損傷模型；藥物預(yù)處理組和后處理組分別于術(shù)前1h、術(shù)中尾靜脈注射P38MA

2、PK抑制劑(SB203580)(1mg／kg),另外兩組注入等量生理鹽水,各組于再灌注后0、1、3小時(shí)檢測各指標(biāo)。
　　 2、硫代巴比妥酸反應(yīng)法檢測血清中MDA含量。
　　 3、鄰苯三酚自氧化法檢測血清中SOD活性。
　　 4、雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測大鼠血清中ICAM-1、TNF-α的表達(dá)。
　　 5、RT-PCR檢測血清中ICAM-1mRNA、TNF-αmRNA的表達(dá)。
　　

3、 6、Western-blot印跡法檢測腓腸肌組織磷酸化P38MAPK蛋白水平。
　　 結(jié)果:一、大鼠下肢缺血再灌注損傷的造模。
　　 缺血再灌注損傷組大鼠血清中MDA含量明顯升高、SOD活性明顯降低,從而證實(shí)大鼠下肢缺血再灌注損傷的造模成功。
　　 二、大鼠下肢缺血再灌注損傷對其血清中ICAM-1及TNF-α的影響。
　　 1、缺血再灌注損傷組與假手術(shù)組相比,大鼠血清中ICAM-1、TNF-α濃度總體

4、呈升高趨勢(P<0.05),并于作用1h時(shí)達(dá)高峰。
　　 2、缺血再灌注損傷組與假手術(shù)組相比,大鼠腓腸肌組織磷酸化P38MAPK表達(dá)明顯增加(P<0.05),并于作用1h時(shí)達(dá)高峰。
　　 三、P38MAPK抑制劑預(yù)處理和后處理對大鼠下肢缺血再灌注損傷誘導(dǎo)的ICAM-1及TNF-α的影響。
　　 1、與對照組相比,P38MAPK抑制劑對大鼠下肢缺血再灌注損傷誘導(dǎo)的ICAM-1及TNF-α的表達(dá)增加有抑制作用(P<0

5、.05)。與后處理組相比,P38MAPK抑制劑預(yù)處理組對缺血再灌注損傷誘導(dǎo)的ICAM-1及TNF-α的表達(dá)增加的抑制作用更明顯(P<0.05)。
　　 2、與對照組相比,P38MAPK抑制劑對大鼠下肢缺血再灌注損傷誘導(dǎo)的大鼠腓腸肌組織磷酸化P38MAPK表達(dá)明顯增加有抑制作用(P<0.05).與后處理組相比,P38MAPK抑制劑預(yù)處理組對缺血再灌注損傷誘導(dǎo)的腓腸肌組織磷酸化P38MAPK表達(dá)增加的抑制作用更明顯(P<0.05)。