異氟烷對大鼠缺血再灌注損傷肝臟ICAM-1表達及中性粒細胞浸潤的影響.pdf

1、目的：本研究旨在通過建立大鼠部分肝臟缺血再灌注模型，觀察異氟烷麻醉大鼠對常溫肝臟缺血再灌注損傷的影響，探討異氟烷抗炎作用參與減輕肝臟缺血再灌注損傷的可能機制。 材料與方法：雌性SD大鼠32只，分為4組，每組8只：(1)PB-Sham組，大鼠行腹腔注射1％戊巴比妥鈉(PB)40mg·kg-1麻醉，進行手術(shù)但不阻斷入肝血流。(2)PB-IR組，采用戊巴比妥鈉麻醉后行部分肝臟缺血再灌注(IR)。(3)Iso-Sham組，大鼠僅接受1.

2、0MAC異氟烷(Iso)吸入麻醉，不阻斷血流。(4)Iso-IR組，建立缺血再灌注模型期間采用1.0MAC異氟烷麻醉大鼠。大鼠常溫部分肝臟缺血再灌注損傷模型的建立，通過夾閉肝動脈和門靜脈左支(支配肝左葉和中葉)，造成約70％肝臟缺血60min、再灌注3h。實驗終點，采取肝組織和血液標本。血清ALT和AST作為肝損害的標志被檢測；肝組織內(nèi)髓過氧化物酶(MPO)活力測定；用RT-PCR檢測肝臟組織ICAM-1和TNF-αmRNA轉(zhuǎn)錄水平；肝

3、組織中ICAM-1蛋白表達變化采用免疫組織化學染色和免疫印跡(westernblot)方法檢測；進行HE染色行病理學檢查。 結(jié)果： 1.血清中ALT和AST水平的變化PB-IR組大鼠血清ALT，AST酶水平與其他三組相比較明顯升高(p＜0.05)，Iso-IR組的大鼠血清酶與PB-Sham組和Iso-Sham組相比有明顯增加(p＜0.05)，但是較PB-IR顯著降低(p＜0.05)。 2.肝組織中ICAM-1和T

4、NF-αmRNA變化PB-IR組ICAM-1和TNF-α的基因表達較其他三組明顯升高(P＜0.05)，Iso減弱ICAM-1和TNF-α基因表達水平(P＜0.05)。 3.肝組織ICAM-1免疫組化結(jié)果PB-Sham組和Iso-Sham組血竇內(nèi)皮細胞，肝細胞、中央靜脈和小葉間靜脈微弱表達。PB-IR組內(nèi)皮細胞、中央靜脈和小葉間靜脈管壁強表達，肝細胞少量微弱表達。Iso-IR組可見內(nèi)皮細胞和肝細胞輕度表達，較PB-IR組弱(P＜0

5、.05)。 4.肝組織ICAM-1蛋白質(zhì)水平測定雜交帶密度值，以其表示ICAM-1蛋白的表達水平。PB-IR組較其它三組明顯增加(p＜0.05)。Iso-IR組與PB-Sham組和Iso-Sham組相比表達水平略增強，但是較PB-IR組明顯減弱，且差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。 5.MPO水平Iso-IR大鼠肝組織內(nèi)MPO與PB-Sham組和Iso-Sham組相比有明顯增加(p＜0.05)，但是較PB-IR顯著降低(

6、p＜0.05)。PB-IR組MPO水平較其他三組相明顯升高(p＜0.05)。 6.HE染色肝組織病理學改變PB-Sham組和Iso-Sham組的肝組織基本正常。PB-IR組多見局灶性肝細胞壞死，亦可見肝細胞凝固性壞死；小葉周邊區(qū)及中央靜脈周圍可見明顯的肝細胞脂肪變性，肝索結(jié)構(gòu)被破壞。Iso-IR組中央靜脈和肝臟血竇稍擴張，淤血。少量肝細胞變性，可見點狀壞死，肝細胞脂肪變性，匯管區(qū)可見少量炎癥細胞浸潤，肝索結(jié)構(gòu)基本正常存在。

7、 結(jié)論： 1.常溫下對大鼠行70％的肝臟血流阻斷60min、再灌注3h期間采用異氟烷(1.0MAC)麻醉較使用戊巴比妥鈉麻醉明顯減輕血清ALT和AST。 2.戊巴比妥鈉麻醉大鼠肝臟缺血再灌注后ICAM-1的基因轉(zhuǎn)錄和蛋白表達明顯增加。 3.異氟烷較戊巴比妥鈉明顯抑制大鼠肝臟缺血再灌注后。ICAM-1的基因轉(zhuǎn)錄和蛋白表達。 4.戊巴比妥鈉麻醉大鼠肝臟缺血再灌注后TNF-α的基因轉(zhuǎn)錄明顯增加，異氟烷抑制TN