膽道阻塞后大鼠肝臟中法尼酯衍生物X受體基因表達(dá)變化及意義.pdf

1、法尼酯衍生物X受體(farnesoid X receptor,FXR)是重要的孤兒核受體之一,主要在肝臟中表達(dá)。由于生理水平的膽汁酸是FXR的內(nèi)源性配體,因此FXR對(duì)膽汁酸和膽固醇穩(wěn)態(tài)有重要的調(diào)節(jié)作用?？刂颇懼岬暮铣珊娃D(zhuǎn)運(yùn),防止肝細(xì)胞內(nèi)膽汁酸的過(guò)度堆積可改善和治療與膽汁酸代謝相關(guān)疾病。
　　 在正常生理狀態(tài)下,FXR可通過(guò)與靶基因啟動(dòng)子上的FXR反應(yīng)元件的結(jié)合,使一系列參與調(diào)節(jié)膽汁酸和膽固醇代謝的基因發(fā)生表達(dá)變化,從而影響機(jī)體

2、的膽汁酸和膽固醇代謝。隨著FXR內(nèi)源性配體和FXR分子結(jié)構(gòu)與功能研究進(jìn)展,人們發(fā)現(xiàn)FXR的激動(dòng)劑和拮抗劑可通過(guò)干預(yù)膽汁酸的合成、轉(zhuǎn)運(yùn)和吸收,治療膽汁淤積性肝病。目前已知的FXR有效內(nèi)源性配體有:鵝脫氧膽酸(chenodeoxycholic acid,CDCA)、石膽酸(lithocholicacid,LCA)、脫氧膽酸(desoxycholic acid,DCA)和膽酸(cholic acid,CA),而又以CDCA激活作用最明顯。

3、r>　　 阻塞性黃疸(簡(jiǎn)稱阻黃)是由肝內(nèi)、外膽管的機(jī)械性損傷使膽汁酸在肝內(nèi)瘀積所導(dǎo)致的全身多系統(tǒng)臨床病癥。阻黃時(shí),由于膽汁酸不能排出腸道,使正常膽汁酸肝腸循環(huán)受阻,血清中膽汁酸含量升高,刺激FXR表達(dá)上調(diào)。近來(lái)發(fā)現(xiàn),膽道阻塞后,隨阻塞時(shí)間的延長(zhǎng),FXR表達(dá)減弱。因此,研究膽道阻塞后肝臟中的FXR基因表達(dá),搞清膽道阻塞過(guò)程與FXR表達(dá)的變化關(guān)系,對(duì)阻塞性黃疸的臨床治療具有十分重要的意義。
　　 目的:探討應(yīng)用FXR藥物治療肝膽疾

4、病的可行性,證明FXR作為治療阻塞性黃疸疾病的新型藥物靶點(diǎn),發(fā)現(xiàn)FXR靶基因的新型激動(dòng)劑,為治療膽汁淤積性疾病奠定了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
　　 方法:通過(guò)建立大鼠膽管阻塞模型,觀察大鼠膽管阻塞1d、3d、7d和14d四個(gè)時(shí)段的肝臟組織形態(tài)學(xué)改變;檢測(cè)這四個(gè)不同時(shí)段的大鼠血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)、總膽紅素(TB)和總膽汁酸(TBA)等血液生化指標(biāo);通過(guò)免疫組化方法觀察大鼠膽管阻塞不

5、同時(shí)段的FXR表達(dá)變化,同時(shí)利用上述方法研究CDCA在大鼠膽管阻塞進(jìn)程中的作用。
　　 結(jié)果:大鼠膽管阻塞后,隨時(shí)間延長(zhǎng)肝內(nèi)血管充血,細(xì)胞腫脹變性;肝內(nèi)膽管擴(kuò)張,纖維組織增生,但14d后癥狀有所緩解;隨大鼠膽管阻塞時(shí)間延長(zhǎng),血清中ALT(858.55±299.02,928.57±349.24,1031.58±354.08,986.17±34.22)、AST(354.56.±99.10,381.62±148.89,438.67±1

6、07.87,294.59±17.83)、ALP(557.33±41.86,673.33±18.27,868.42±177.60,795.83±73.37)、TB(106.67±59.46,133.58±17.69,147.13±22.59,135.87±6.53)和TBA(92.33±42.89,184.68±37.67,277.58±35.87,253.85±20.06)明顯升高。第7d達(dá)到峰值,與對(duì)照組相比差異有顯著性(P＜0.05

7、),第14d后均明顯下降;CDCA可不同程度的降低大鼠血清中ALT(745.32±177.10、839.94±48.40、934.54±22.81、873.17±31.15)、AST(312.83±77.33、356.54±84.54、430.35±50.01、192.64±34.52)、ALP(466.83±48.57、551.69±36.78、648.38±65.47、587.23±58.46)、TB(79.42±12.54、100

8、.55±45.12、107.33±57.48、112.65±33.06)和TBA(63.55±8.12、124.61±32.41、154.35±5.52、156.05±22.02)的水平。另外,隨大鼠膽管阻塞時(shí)間的延長(zhǎng),FXR表達(dá)上調(diào),第7d最為明顯。CDCA治療可明顯減輕大鼠膽管阻塞后所致的肝臟損傷,CDCA可抑制FXR的表達(dá)上調(diào)。
　　 結(jié)論:膽管阻塞可導(dǎo)致肝損傷和肝纖維化,其程度和血清中的ALT和AST水平呈密切相關(guān)。膽道