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文檔簡介
1、目的:檢測大鼠肺組織缺血再灌注損傷過程中后microRNA(miRNA)的表達(dá)變化,探討microRNA與肺組織缺血及再灌注損傷的相關(guān)性。
方法:采用改良Eppinger描述的大鼠肺缺血再灌注損傷動物模型,將25只大鼠隨機(jī)分為五組,分別為對照組、缺血組(1h)與缺血再灌注組(1h、3h、6h三個亞組)。應(yīng)用基因芯片技術(shù)(microarray)檢測對照組、缺血組與缺血再灌注組肺組織中microRNA表達(dá)水平。運(yùn)用stem-l
2、oopRT-qPCR法檢測芯片結(jié)果明顯變化的4個microRNA在對照組、缺血組(1h)與缺血再灌注組(1h、3h、6h三個亞組)五組中的表達(dá)水平。動態(tài)觀察大鼠肺缺血再灌注損傷急性期microRNA的變化。
結(jié)果:1.基因芯片技術(shù)(microarray)檢測正常組與缺血組肺組織中390個microRNA表達(dá)水平變化,與對照組相比,缺血肺組織中有4個miRNA表達(dá)上調(diào)兩倍及兩倍以上,21個miRNA表達(dá)下調(diào)兩倍及兩倍以上。<
3、br> 2.運(yùn)用stem-loopRT-qPCR檢測法檢測miR-1、miR-18a、miR-31和miR-451在對照組與實(shí)驗(yàn)組的肺組織中的表達(dá)水平,發(fā)現(xiàn)在對照組、缺血組及再灌注組的各個時間點(diǎn)miR-1、miR-18a表達(dá)先上調(diào)再下調(diào);miR-31表達(dá)先下調(diào)再上調(diào)再下調(diào),在再灌注1h達(dá)到最低點(diǎn),再灌注3h表達(dá)水平最高:miR-451表達(dá)先上調(diào)再下調(diào),在再灌注3h達(dá)到最高點(diǎn)。
結(jié)論:大鼠肺組織急性缺血期,多個miRN
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