納米粒子載紫杉醇抑制胃癌細(xì)胞增殖及相關(guān)機(jī)制的研究.pdf

1、目的：
　　研究PTX-NPs是否比PTX有更好的腫瘤細(xì)胞增殖抑制作用；研究 PTX-NPs和PTX抑制腫瘤細(xì)胞增殖的相關(guān)機(jī)制。
　　方法：
　　以HepG2、Hela、A549、SGC-7901細(xì)胞為實驗對象，MTT法檢測PTX-NPs和PTX對腫瘤細(xì)胞的增殖抑制率；以SGC-7901為實驗對象，采用流式細(xì)胞儀檢測PTX-NPs和PTX對胃癌細(xì)胞細(xì)胞周期分布的影響；免疫熒光染色檢測細(xì)胞核中phospho-ATM和rH

2、2AX焦點(diǎn)的生成；western blotting檢測PTX-NPs和PTX對ATM和p-ATM、H2AX和rH2AX、p-Cdc25C和p-cdc2、CyclinB1、Chk2和p-Chk2、p53和p-p53等細(xì)胞周期相關(guān)蛋白表達(dá)的影響。
　　結(jié)果：
　　MTT結(jié)果顯示，PTX-NPs和PTX對體外培養(yǎng)的HepG2、Hela、A549、SGC-7901細(xì)胞均有較強(qiáng)的抑制作用，抑制率呈濃度依賴性，且相同濃度下，PTX-NP

3、s對腫瘤細(xì)胞的抑制效果比PTX更明顯；流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果顯示，PTX-NPs和PTX均能使SGC-7901的細(xì)胞周期阻滯于G2/M期，G2/M期分布的百分率隨藥物濃度增加而增加，且相同濃度下，PTX-NPs對細(xì)胞周期分布的影響大于PTX；免疫熒光染色結(jié)果顯示，PTX-NPs和PTX能濃度依賴性地引起p-ATM和rH2AX焦點(diǎn)的生成，且相同濃度下，PTX-NPs引起焦點(diǎn)生成的能力強(qiáng)于PTX；采用western blotting檢測PTX-

4、NPs和PTX對細(xì)胞周期相關(guān)蛋白表達(dá)的影響，結(jié)果顯示，PTX-NPs和PTX能磷酸化激活A(yù)TM、增加rH2AX的量；增加p-Cdc25C和p-cdc2的表達(dá)；增加Chk2、p53磷酸化的量；對CyclinB1表達(dá)量的影響不大。且PTX-NPs對蛋白表達(dá)量變化的影響均大于PTX。
　　結(jié)論：
　　PTX-NPs抑制腫瘤細(xì)胞增殖的作用明顯大于PTX，且二者均可通過誘導(dǎo)DNA損傷，激活細(xì)胞周期檢驗點(diǎn)，使細(xì)胞周期阻滯于G2/M期而發(fā)