中藥復方“連黃”對金黃色葡萄球菌耐藥基因femA影響的研究.pdf

1、本試驗應用體外培養(yǎng)試驗來初步研究中藥復方“連黃”對耐藥金黃色葡萄球菌的β-內(nèi)酰胺類藥物耐藥性的抑制作用。通過瓊脂平板點種培養(yǎng)法檢測亞抑菌濃度的中藥復方“連黃”對金黃色葡萄球菌的β-內(nèi)酰胺類藥物的耐藥性抑制率，同時將“連黃”對金黃色葡萄球菌株的耐藥抑制率分別與敏感金黃色葡萄球菌進行比較，經(jīng)統(tǒng)計學分析，判斷耐藥性抑制劑的作用效果。通過藥敏紙片法檢測β-內(nèi)酰胺類藥物對中藥復方“連黃”作用前后的耐藥金黃色葡萄球菌的抑菌環(huán)大小的改變，同時將β-內(nèi)

2、酰胺類藥物對中藥復方“連黃”作用后的耐藥金黃色葡萄球菌的抑菌環(huán)與其對敏感金黃色葡萄球菌的抑菌環(huán)大小進行比較，經(jīng)統(tǒng)計學分析，判斷耐藥性抑制劑的作用效果。
　　本研究采用聚合酶鏈式反應（PCR）擴增耐藥金黃色葡萄球菌的耐藥基因 femA。對臨床分離的耐藥金黃色葡萄球菌N01、敏感金黃色葡萄球菌B1、實驗室誘導產(chǎn)生耐藥性的金黃色葡萄球菌D01、耐藥金黃色葡萄球菌868（韓國菌株）的耐藥基因femA進行對比、分析不同菌株間該基因的同源性關

3、系。通過耐藥基因失活試驗、PCR法檢測中藥復方“連黃”對金黃色葡萄球菌的耐藥基因 femA的影響，初步探討中藥復方“連黃”降低金黃色葡萄球菌對β-內(nèi)酰胺類藥物耐藥性的作用機制。
　　結果：通過瓊脂平板點種法結果可知，中藥復方“連黃”對金黃色葡萄球菌868、D01的耐藥性抑制率與敏感金黃色葡萄球菌B1比較差異不顯著（p>0.05），對金黃色葡萄球菌N01、N02的耐藥性抑制率與敏感金黃色葡萄球菌B1比較差異顯著（p<0.05）。藥敏

4、紙片法結果可知，經(jīng)中藥復方“連黃”作用后，β-內(nèi)酰胺類藥物對金黃色葡萄球菌868、D01的抑菌環(huán)大小與其對敏感金葡菌B1的抑菌環(huán)大小比較差異不顯著（p>0.05），對金黃色葡萄球菌N01、N02的抑菌環(huán)大小與其對敏感金鋪菌B1的抑菌環(huán)大小比較差異顯著（p<0.05）。PCR法擴增的耐藥金黃色葡萄球菌D01的femA基因與GenBank中序列號為AF144461的耐藥金黃色葡萄球菌耐藥基因femA的同源性達99％，表明實驗室成功擴增出金黃

5、色葡萄球菌的耐藥基因femA；PCR法擴增的耐藥金黃色葡萄球菌868、、N01株的femA基因與AF144461的同源性均達到98％。中藥復方“連黃”作用前后金黃色葡萄球菌的耐藥基因femA在23～72堿基區(qū)內(nèi)發(fā)生較大改變，其對應的氨基酸序列也發(fā)生改變。
　　結論：中藥復方“連黃”可有效的降低金黃色葡萄球菌對β-內(nèi)酰胺類藥物的耐藥性，但對耐藥金黃色葡萄球菌N02株無效；耐藥金葡菌868、D01、N01的femA基因片段突變位點集中