金黃色葡萄球菌耐藥特征和蛋白A基因同源性分析.pdf

1、目的：分析我院2007年12月份分離的金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus，S.a)臨床菌株耐藥特點(diǎn)；在蛋白A基因(簡稱SPA)多樣性的基礎(chǔ)上，運(yùn)用PCR擴(kuò)增技術(shù)分析其同源性特點(diǎn)，找出在該時期內(nèi)的流行菌株，為指導(dǎo)臨床經(jīng)驗(yàn)用藥提供參考。 方法：首先采用K-B紙片擴(kuò)散法進(jìn)行藥敏實(shí)驗(yàn)，參照NCCLS標(biāo)準(zhǔn)觀察其耐藥特點(diǎn)并行MRSA與MSSA區(qū)分，然后應(yīng)用PCR法對21株金黃色葡萄球菌臨床菌株的SPA-X區(qū)域進(jìn)行擴(kuò)增

2、，然后將所得的PCR產(chǎn)物測序，再將DNA的序列與數(shù)據(jù)庫http：//www. ridom. de/spaserver/進(jìn)行比對行SPA基因分型。 結(jié)果：1.本月共分離出21株金黃色葡萄球菌，根據(jù)其耐藥特點(diǎn)，將其分為甲氧西林耐藥的金黃色葡萄球菌(methicillin-resistant S.aureus MRSA)和對甲氧西林敏感的金黃色葡萄球菌(methicillin-sensitive staphylococcus aure

3、us MSSA)MSSA兩型，其中MRSA共12株，MSSA共9株。 2.21株菌株均對青霉素耐藥，紅霉素，克林霉素耐藥株共19株(19/21);環(huán)丙沙星，左氧氟沙星各有14株耐藥(14/21);慶大霉素，苯唑西林各有12株耐藥(12/21);未發(fā)現(xiàn)萬古霉素耐藥株。 3.所分離的MRSA均為多重耐藥株，MRSA均對青霉素、阿莫西林、紅霉素、克林霉素耐藥；環(huán)丙沙星、左氧氟沙星各有11株耐藥(11/12)；慶大霉素有10株耐

4、藥(10/12)。MSSA均對青霉素耐藥；紅霉素、克林霉素各有7株耐藥(7/9)；環(huán)丙沙星、左氧氟沙星各有3株耐藥(3/9)，無阿莫西林耐藥株。除萬古霉素及青霉素外，MRSA對其他抗生素的耐藥株均多于MSSA。 4.當(dāng)月分離的菌株中院內(nèi)獲得性感染占大多數(shù)(15/21)。除青霉素和萬古霉素外，院內(nèi)感染的菌株對其它抗菌藥的耐藥株數(shù)均大于社區(qū)獲得性感染菌株。除萬古霉素外，院內(nèi)感染菌株對其余抗菌藥的耐藥數(shù)量至少在11株以上(11/15)

5、。 5.在該月份內(nèi)分離的菌株共發(fā)現(xiàn)10個SPA型，以t037最多，共10株，全部為院內(nèi)獲得性感染，其中來源于燒傷整容4株、骨科2株、外科ICU、胃腸外科、耳鼻喉科、老年呼吸科各1株，為當(dāng)月的流行菌株，且均為院內(nèi)獲得性感染菌株；其次為t030共3例，其余菌株型各1例，分別為t4594、t1425、t1376、t284、t701、t159、t179、t437。散發(fā)菌株以社區(qū)獲得性感染多見(6/11)。 6.10株t037，M

6、RSA共8株，MSSA共2株；所有t037菌株均對青霉素、慶大霉素、環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、紅霉素、克林霉素耐藥。MSSA除對苯唑西林、阿莫西林敏感外，與MRSA耐藥譜相同。 7.將69671號菌株的SPA-x區(qū)序列與數(shù)據(jù)庫http：//www. ridom. de/spaserver/比對后確認(rèn)為國際上首次發(fā)現(xiàn)的新型菌株，將其正反序列提交到該數(shù)據(jù)庫，定為t4594型。通過藥敏試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，該菌株為MSSA，僅對青霉素，紅霉素、克林霉

7、素耐藥；耐藥譜型與t159，t1425，t284一致。 結(jié)論：1.本次分離的臨床菌株總體耐藥程度較高，青霉素耐全部耐藥，其余抗生素除萬古霉素外耐藥株均在12株以上(12/21);10株MRSA僅對萬古霉素敏感，說明治療金葡菌尤其是MRSA引起的感染是臨床上的一大難題。 2.本次分離的菌株以院內(nèi)獲得性感染菌株為主(15/21)，院內(nèi)感染株的耐藥比例顯然高于社區(qū)獲得性感染菌株。 3.t037為本月的流行菌株，占總分離