河北省乳源金黃色葡萄球菌耐藥性檢測(cè)及耐藥基因的研究

1、分類號(hào)：密 級(jí)：S 墨5 5 ：3公開(kāi)單位代碼：學(xué) 號(hào)：1 0 0 8 62 0 1 3 9 1 4 0 6 8 2河北省乳源金黃色葡萄球菌耐藥性檢測(cè)及耐藥基因的研究R e s e a r c h o n d r u g r e s i s t e n c ea n d r e s i s t a n tg e n e s o f t h eS t a p h y l o c o c c u s a u r e u sf r o m R

2、 a w M i l ki np r o v i n c eo f H e b e i學(xué)位申請(qǐng)人：杜偉偉指導(dǎo)教師：張鐵教授學(xué)位名稱：獸醫(yī)碩士研究領(lǐng)域：授予單位：河北農(nóng)業(yè)大學(xué)答辯日期：二。一五年五月三十一日摘要本試驗(yàn)主要研究河北省石家莊、保定、廊坊、承德、邢臺(tái)、張家口、唐山7 個(gè)地區(qū)集約化奶牛場(chǎng)臨床分離的奶牛乳房炎病原菌．金黃色葡萄球菌( S t a p h y l o c o c c u sa u r e u s S ．A ) 的主要生

3、物學(xué)特性、耐藥性及耐藥基因的相關(guān)性。通過(guò)細(xì)菌生化試驗(yàn)及P C R 方法的鑒定，分離出1 0 9 株乳源金黃色葡萄球菌，按照世界衛(wèi)生組織W H O 推薦的K i r b y ．B a u e r 菌液涂布法對(duì)1 0 9 株乳源金黃色葡萄球菌進(jìn)行了3 8 種抗生素的藥物敏感試驗(yàn)，結(jié)果顯示：1 0 9 株乳源金黃色葡萄球菌對(duì)各類抗生素均有不同程度的耐藥，且均表現(xiàn)為多重耐藥，較為敏感的抗生素是頭孢菌素類和氨基糖苷類，其中以頭孢拉定、頭孢氨芐、慶

4、大霉素、阿米卡星、頭孢吡肟、新霉素最為敏感；對(duì)磺胺類藥物、青霉素類、林可胺類、大環(huán)內(nèi)酯類和四環(huán)素類抗生素耐藥嚴(yán)重，其中以磺胺異惡唑、氨芐西林、甲氧胺嘧啶、復(fù)方新諾明、阿莫西林、強(qiáng)力霉素、紅霉素、克拉霉素、阿奇霉素、林可霉素耐藥性最為嚴(yán)重。藥敏試驗(yàn)為河北省區(qū)域內(nèi)奶牛乳房炎的治療提供科學(xué)的用藥依據(jù)和用藥指南。此外，本試驗(yàn)利用P C R 技術(shù)對(duì)1 0 9 株乳源金黃色葡萄球菌進(jìn)行了8 類抗生素耐藥基因的檢測(cè)，結(jié)果如下：( 1 ) 磺胺類耐藥基

5、因s u l l 、s u l 2 、s u l 3 陽(yáng)性率分別為4 5 ．8 7 ％、6 ．4 2 ％、1 ．8 3 ％，有5 5 株細(xì)菌含有該類耐藥基因，總檢出率為5 0 ．4 6 ％，無(wú)同時(shí)攜帶三種耐藥基因的菌株；( 2 ) 四環(huán)素類耐藥基因t e t A 、t e t B 、t e t C 、t e t M 陽(yáng)性率分別為4 1 ．2 8 ％、1 8 ．3 5 ％、4 3 ．1 2 ％、1 0 ．0 9 ％，8 8 株細(xì)菌擴(kuò)增出四

6、環(huán)素類耐藥基因，總分離率為8 0 ．7 3 ％，有1 株攜帶4 種耐藥基因，2 1 株細(xì)菌未檢出；( 3 ) 氨基糖類耐藥基因a a c ( 6 ’) ／a p h ( 2 ”) 總檢出率為6 6 ．9 7 ％，另有3 6 株細(xì)菌未攜帶該類耐藥基因；( 4 ) 1 3 ．內(nèi)酰胺類耐藥基因m e c A 的陽(yáng)性率為O ％，而f e m A 陽(yáng)性率分1 0 0 ％，推導(dǎo)試驗(yàn)菌株對(duì)B ．內(nèi)酰胺類抗生素耐藥機(jī)制主要是由f e m A 基因介導(dǎo)的

7、；( 5 ) 大環(huán)內(nèi)酯．林可胺類耐藥基因e r m A 和e r m C 的陽(yáng)性率分別為9 8 ．1 7 ％、6 2 ．3 9 ％，所有菌株均攜帶此類耐藥基因，總檢出率為1 0 0 ％；( 6 ) 喹諾酮類耐藥基因n o r A ，檢出率為5 9 ．2 6 ％，隨機(jī)選取3 0 株耐喹諾酮類抗生素菌株，對(duì)其進(jìn)行g(shù) d A 與g y r A 基因Q R D R 序列的檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，剛A 基因編碼的第8 0 位氨基酸發(fā)生突變，g y r A

8、 基因編碼的第8 4 位氨基酸發(fā)生突變，且有1 6 株發(fā)生了g y r A 和g r l A 雙突變；( 7 ) 氯霉素類耐藥基因c m l A 、c a t l 、f l o r 其對(duì)應(yīng)的陽(yáng)性率分別為O ％、2 2 ．0 2 ％、3 3 ．0 3 ％，未帶任何氯霉素類耐藥基因的菌株有5 5 株，占5 0 ．4 6 ％；( 8 ) 糖肽類耐藥基因v a n A 、v a n B 陽(yáng)性率分別為6 6 ．9 7 ％和6 3 ．3 0 ％，有