Survivin siRNA、HSP70雙基因轉(zhuǎn)染對肝癌細(xì)胞系HepG2內(nèi)源Survivin及HSP70表達(dá)的影響.pdf

1、目的:探討survivin siRNA、HSP70雙基因轉(zhuǎn)染對肝癌細(xì)胞系HepG2內(nèi)源survivin、HSP70表達(dá)的影響，為進(jìn)一步深入研究survivin siRNA、HSP70雙基因?qū)Ω伟┘?xì)胞系HepG2生物學(xué)特性的影響奠定實驗基礎(chǔ)。 方法:1、常規(guī)培養(yǎng)肝癌細(xì)胞系HepG2。2、將已構(gòu)建的真核表達(dá)載體(pLRES2-EGFP-survivin siRNA、plRES2-EGFP-HSP70)用脂質(zhì)體介導(dǎo)轉(zhuǎn)染肝癌細(xì)胞系Hep

2、G2，轉(zhuǎn)染72小時，收集各組細(xì)胞，利用倒置熒光顯微鏡觀察轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞，通過RT-PCR、western-blot檢測轉(zhuǎn)染后細(xì)胞中survivin mRNA、survivin蛋白及HSP70蛋白表達(dá)的變化。 結(jié)果:1、轉(zhuǎn)染真核表達(dá)載體與轉(zhuǎn)染空載體的肝癌細(xì)胞系HepG2于倒置熒光顯微鏡下可見綠色熒光。2、轉(zhuǎn)染真核表達(dá)載體的HepG2細(xì)胞與轉(zhuǎn)染空載體的HepG2細(xì)胞和未轉(zhuǎn)染的HepG2細(xì)胞相比，survivin mRNA和sur-vi