不同因子對HeLa細(xì)胞增殖、凋亡和HSP70表達(dá)的影響.pdf

1、　　本實(shí)驗(yàn)對HeLa細(xì)胞進(jìn)行不同因子處理，首先測定最佳的應(yīng)激處理?xiàng)l件，然后在確定應(yīng)激條件的基礎(chǔ)上，分別測定細(xì)胞HSP70表達(dá)、細(xì)胞增殖及凋亡情況，旨在探討不同應(yīng)激處理下HeLa細(xì)胞凋亡、增殖與HSP70表達(dá)的關(guān)系，以及HSP70影響凋亡的可能通路，以闡明其在細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路和細(xì)胞增殖與熱應(yīng)激調(diào)控中的作用與機(jī)制。本實(shí)驗(yàn)主要分為兩部分： 一、不同熱處理對HeLa細(xì)胞增殖、凋亡和HSP70表達(dá)的影響 　　通過對HeLa細(xì)胞

2、不同溫度下的熱處理，觀察不同溫度處理后細(xì)胞活率、凋亡及HSP70表達(dá)的情況。結(jié)果表明，各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞均出現(xiàn)凋亡；45℃處理對細(xì)胞的抑制作用最強(qiáng)，表達(dá)HSP70量最高，43℃次之，41℃最低。41℃、43℃熱處理HSP70表達(dá)高峰出現(xiàn)在24h；45℃熱處理HSP70表達(dá)高峰出現(xiàn)在30h，此結(jié)果為進(jìn)一步探討HSP70蛋白對細(xì)胞生存、增殖及熱耐受性的機(jī)制提供了依據(jù)。 二、激素、化學(xué)物質(zhì)對HeLa細(xì)胞增殖、凋亡和熱休克蛋白70表達(dá)的影響

3、 　　本試驗(yàn)以地塞米松(dexamethasone，Dex)、吐溫-80(Tween-80)、氨茶堿(Aminophylline)、乙二胺四乙酸(EDTA)、Ca2+、雙氧水(H2O2)為應(yīng)激源，旨在探討不同應(yīng)激處理下HeLa細(xì)胞凋亡、增殖及HSP70表達(dá)的特點(diǎn)和規(guī)律，以及HSP70可能的表達(dá)通路。結(jié)果表明，Dex(10-3～10-6mol/L)、Ca2+和H2O2劑量依賴性的抑制HeLa細(xì)胞增殖；Tween-80濃度在1﹪(v/v)

4、和0.1﹪時(shí)對HeLa細(xì)胞增殖抑制差異極顯著；EDTA濃度在10-2、10-3時(shí)對HeLa細(xì)胞增殖抑制作用較對照組差異極顯著；Aminophylline對HeLa細(xì)胞增殖的影響不呈現(xiàn)劑量依賴性。HeLa細(xì)胞經(jīng)應(yīng)激處理后，除EDTA處理組未出現(xiàn)凋亡外，其余組均見DNA降解，形成梯形條帶；各處理組HSP70表達(dá)較對照組有所提高，其中雙氧水和氨茶堿處理組與對照組相比差異極顯著，Dex和Tween-80處理組與對照組相比差異顯著，EDTA和Ca