兔膝關(guān)節(jié)透明軟骨損傷對(duì)半月板影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景與目的 膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎(0A)是中老年常見疾病，其發(fā)生機(jī)制尚未完全明了。隨著人類整體壽命延長(zhǎng)，眾多國(guó)家進(jìn)入老齡化社會(huì)，骨性關(guān)節(jié)炎發(fā)病率逐年快速增長(zhǎng)。近年來，生物學(xué)、遺傳學(xué)、生物化學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)研究飛速進(jìn)展，各種現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)生物技術(shù)與方法滲透到骨性關(guān)節(jié)炎研究中。目前國(guó)內(nèi)外學(xué)者進(jìn)行了多方面研究，大多數(shù)實(shí)驗(yàn)及臨床研究著眼于膝關(guān)節(jié)軟骨退變、骨質(zhì)增生、滑膜炎等有關(guān)生理及病理變化，而半月板在膝骨性關(guān)節(jié)炎病理變化中的作用并未引起足夠重視。研

2、究表明膝關(guān)節(jié)半月板在傳導(dǎo)負(fù)載，提高關(guān)節(jié)接觸面積方面具有重要作用，而不同原因所致半月板病變導(dǎo)致膝關(guān)節(jié)載荷傳導(dǎo)紊亂，可引起關(guān)節(jié)軟骨退變及臨近部位軟骨增生，因此膝半月板功能缺陷是罹患膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎的高危因素之一。目前關(guān)于半月板損傷、切除而導(dǎo)致膝骨性關(guān)節(jié)炎的研究頗多，而關(guān)于骨性關(guān)節(jié)炎導(dǎo)致半月板病變的研究尚少，其與膝骨性關(guān)節(jié)炎發(fā)病機(jī)制關(guān)系尚不清楚。本實(shí)驗(yàn)的目的在于進(jìn)一步研究膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎中半月板病理變化及其與膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎之間的相互關(guān)系。

3、 材料與方法 雌性中國(guó)家兔24只，體重2．2～2．6kg，平均20月齡。隨機(jī)分為兩組，每組12只兔子。一組12只兔子每只隨機(jī)選擇一側(cè)膝為實(shí)驗(yàn)組，其膝關(guān)節(jié)內(nèi)側(cè)股骨髁負(fù)重面用鋼釘劃槽，造成透明軟骨損傷。另一組12只兔子每只隨機(jī)選擇12個(gè)膝為實(shí)驗(yàn)對(duì)照組，僅給予關(guān)節(jié)切開。上述兩組中術(shù)膝對(duì)側(cè)為正常對(duì)照組，不做任何手術(shù)處理。術(shù)后1周、2周、3周、4周、5周、6周處死動(dòng)物，每次取材于兩組中各用空氣栓塞法處死2只兔子，共8個(gè)膝關(guān)節(jié)。其中實(shí)

4、驗(yàn)組(E)2個(gè)膝、實(shí)驗(yàn)對(duì)照組(c)2個(gè)膝和正常對(duì)照組4(N)個(gè)膝。對(duì)膝關(guān)節(jié)軟骨、內(nèi)側(cè)半月板進(jìn)行大體形態(tài)觀察及測(cè)量半月板脫位指數(shù)，迅速取出內(nèi)側(cè)脛骨平臺(tái)和內(nèi)側(cè)半月板，投入甲醛固定，分別行HE組織切片觀察、甲苯胺藍(lán)切片染色觀察、免疫組化切片觀察。其中將2周、4周、6周取出的手術(shù)實(shí)驗(yàn)組內(nèi)側(cè)半月板中大體觀察改變較顯著的部位切下做掃描電鏡觀察，其余部位同上。第6周取一個(gè)正常半月板做掃描電鏡觀察。 結(jié)果 1．隨取材時(shí)間延長(zhǎng)，實(shí)驗(yàn)組膝關(guān)

5、節(jié)呈進(jìn)行性骨性關(guān)節(jié)炎改變。透明軟骨纖毛變、軟化、潰瘍形成，最終累及全層。半月板退變導(dǎo)致松弛脫位，MDI值隨著時(shí)間延長(zhǎng)而逐步增高。 2．組織學(xué)觀察顯示透明軟骨進(jìn)行性退變，膠原破壞、蛋白聚糖降解、軟骨細(xì)胞變性壞死。半月板也逐步退變，膠原紊亂、間質(zhì)水腫、細(xì)胞變性壞死。免疫組化染色顯示透明軟骨及半月板內(nèi)MMP．3、TIMP-1表達(dá)均明顯升高。 3．掃描電鏡觀察表明半月板表面磨損逐步加重、正常結(jié)構(gòu)紊亂消失、出現(xiàn)裂隙、膠原裸露扭曲等