乳癌發(fā)病機(jī)制的初步探討：兒茶酚雌激素硫酸化和甲基化的關(guān)系及一氧化氮對(duì)雌激素硫酸化的影響.pdf

1、背景：長(zhǎng)時(shí)間高水平雌激素刺激已被公認(rèn)為乳癌的致病危險(xiǎn)因子。既往大量研究集中于雌激素與雌激素受體作用的途徑；近年來，關(guān)于非雌激素受體途徑致乳癌的研究屢見報(bào)道。在細(xì)胞內(nèi)，雌激素，尤其是雌酮和17β-雌二醇可以被代謝為兒茶酚雌激素，繼而被氧化為兒茶酚雌激素一半醌和兒茶酚雌激素醌類，后兩者可以與DNA結(jié)合，使其突變而致癌。因此，機(jī)體中是否存在著某種保護(hù)機(jī)制來阻止這些有害兒茶酚雌激素的產(chǎn)生成為一個(gè)重要的問題。另外，硫酸化是雌激素代謝的重要途徑，有

2、研究顯示一氧化氮可影響乳癌的生長(zhǎng)、分化和轉(zhuǎn)移。一氧化氮是否通過影響雌激素硫酸化從而降低雌激素代謝使乳癌風(fēng)險(xiǎn)增加，他莫昔芬是否通過影響一氧化氮的作用而起到抗乳癌的作用，目前未見報(bào)道。 目的：本研究的第一部分目的在于分析原發(fā)性乳癌患者乳癌組織中雌激素受體(EstrogenReceptor，ER)孕激素受體(ProgesteroneReceptor，PR)分布情況及絕經(jīng)前后ER、PR分布的差別；第二部分探討兒茶酚雌激素硫酸化與甲基化的

3、關(guān)系；第三部分分析一氧化氮供體對(duì)雌激素硫酸化代謝的影響及他莫昔芬對(duì)一氧化氮作用的影響。 方法：第一部分：回顧性分析了2006年1月1日到2008年5月1日共145例于因原發(fā)性乳癌于北京醫(yī)院手術(shù)的患者病理資料，分析其乳癌標(biāo)本ER、PR的分布情況及絕經(jīng)前后ER、PR的差別。第二部分：不同種類的兒茶酚雌激素加入到乳癌細(xì)胞MCF-7和人類乳腺上皮細(xì)胞MCF10A中，并用[35S]標(biāo)記，觀察它們的硫酸化。第三部分：五種一氧化氮供體和17β

4、-雌二醇加入到乳癌細(xì)胞MCF-7和人類乳腺上皮細(xì)胞MCF10A中，觀察它們對(duì)17β-雌二醇的硫酸化的影響；將他莫昔芬、一氧化氮供體SIN-1，17β-雌二醇加入到MCF-7和MCF10A，檢測(cè)他莫昔芬對(duì)一氧化氮作用的影響。 結(jié)果： 第一部分：自2006年1月1日至2008年5月1日于北京醫(yī)院因原發(fā)性乳癌手術(shù)患者共145例，其中雌激素受體分布情況分別如下：ER(-)者共41例(占28.3％)，ER(+)者共104例(占71

5、.7％)；PR(-)者共45例(占31.0％)，PR(+)者共100例(占69.0％)；絕經(jīng)前后ER陽(yáng)性率分別為66.7％和75％，PR陽(yáng)性率分別為68.4％和69.3％，ER、PR的陽(yáng)性率絕經(jīng)后較絕經(jīng)前略有上升，但并無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。第二部分：加入兒茶酚雌激素2-OH-E1，2/4-OH-E2后，在MCF-7和MCF10A細(xì)胞的培養(yǎng)液中產(chǎn)生并釋放被甲基化+硫酸化的硫酸化2-甲氧基-E1，2/4-甲氧基-E2；而加入4-OH

6、-E1時(shí)，細(xì)胞的培養(yǎng)液中則可檢測(cè)到被甲基化+硫酸化的硫酸化4-甲氧基-E1和僅被硫酸化的4-OH-E1。此結(jié)果顯示了兒茶酚-0-甲基轉(zhuǎn)移酶和細(xì)胞液硫酸化轉(zhuǎn)移酶在兒茶酚雌激素代謝中存在著復(fù)雜的相互作用。酶學(xué)分析表明，在已知的人類11種細(xì)胞液硫酸化轉(zhuǎn)移酶中，有五種硫酸化轉(zhuǎn)移酶(SULT1A1，SULT1A2，SULT1A3，SULT1C4和SULT1E1)可以催化兒茶酚雌激素和甲氧基兒茶酚雌激素使之硫酸化，其中以SULT1E1的活性最強(qiáng)。第

7、三部分：五種硝基化化合物(SNP，SNAP，SPONONATE，DETA，SIN-1)在MCF-7和MCF10A細(xì)胞中，均可降低17β-雌二醇硫酸化，并存在濃度依賴性。而他莫昔芬并不降低SIN-1這種作用。 結(jié)論：1、ER、PR陽(yáng)性者占乳癌患者的多數(shù)，絕經(jīng)后ER、PR陽(yáng)性率較絕經(jīng)前略有上升，但并無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。雌激素受體陰性的乳癌患者仍占乳癌患者的相當(dāng)比例。雌激素受體途徑外的乳癌的發(fā)病機(jī)制有待進(jìn)一步研究。2、硫酸化是兒茶酚雌激素代