乳癌發(fā)病機(jī)制的初步探討：兒茶酚雌激素硫酸化和甲基化的關(guān)系及一氧化氮對雌激素硫酸化的影響.pdf

1、背景：長時間高水平雌激素刺激已被公認(rèn)為乳癌的致病危險因子。既往大量研究集中于雌激素與雌激素受體作用的途徑；近年來，關(guān)于非雌激素受體途徑致乳癌的研究屢見報道。在細(xì)胞內(nèi)，雌激素，尤其是雌酮和17β-雌二醇可以被代謝為兒茶酚雌激素，繼而被氧化為兒茶酚雌激素一半醌和兒茶酚雌激素醌類，后兩者可以與DNA結(jié)合，使其突變而致癌。因此，機(jī)體中是否存在著某種保護(hù)機(jī)制來阻止這些有害兒茶酚雌激素的產(chǎn)生成為一個重要的問題。另外，硫酸化是雌激素代謝的重要途徑，有

2、研究顯示一氧化氮可影響乳癌的生長、分化和轉(zhuǎn)移。一氧化氮是否通過影響雌激素硫酸化從而降低雌激素代謝使乳癌風(fēng)險增加，他莫昔芬是否通過影響一氧化氮的作用而起到抗乳癌的作用，目前未見報道。 目的：本研究的第一部分目的在于分析原發(fā)性乳癌患者乳癌組織中雌激素受體(EstrogenReceptor，ER)孕激素受體(ProgesteroneReceptor，PR)分布情況及絕經(jīng)前后ER、PR分布的差別；第二部分探討兒茶酚雌激素硫酸化與甲基化的

3、關(guān)系；第三部分分析一氧化氮供體對雌激素硫酸化代謝的影響及他莫昔芬對一氧化氮作用的影響。 方法：第一部分：回顧性分析了2006年1月1日到2008年5月1日共145例于因原發(fā)性乳癌于北京醫(yī)院手術(shù)的患者病理資料，分析其乳癌標(biāo)本ER、PR的分布情況及絕經(jīng)前后ER、PR的差別。第二部分：不同種類的兒茶酚雌激素加入到乳癌細(xì)胞MCF-7和人類乳腺上皮細(xì)胞MCF10A中，并用[35S]標(biāo)記，觀察它們的硫酸化。第三部分：五種一氧化氮供體和17β

4、-雌二醇加入到乳癌細(xì)胞MCF-7和人類乳腺上皮細(xì)胞MCF10A中，觀察它們對17β-雌二醇的硫酸化的影響；將他莫昔芬、一氧化氮供體SIN-1，17β-雌二醇加入到MCF-7和MCF10A，檢測他莫昔芬對一氧化氮作用的影響。 結(jié)果： 第一部分：自2006年1月1日至2008年5月1日于北京醫(yī)院因原發(fā)性乳癌手術(shù)患者共145例，其中雌激素受體分布情況分別如下：ER(-)者共41例(占28.3％)，ER(+)者共104例(占71

5、.7％)；PR(-)者共45例(占31.0％)，PR(+)者共100例(占69.0％)；絕經(jīng)前后ER陽性率分別為66.7％和75％，PR陽性率分別為68.4％和69.3％，ER、PR的陽性率絕經(jīng)后較絕經(jīng)前略有上升，但并無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。第二部分：加入兒茶酚雌激素2-OH-E1，2/4-OH-E2后，在MCF-7和MCF10A細(xì)胞的培養(yǎng)液中產(chǎn)生并釋放被甲基化+硫酸化的硫酸化2-甲氧基-E1，2/4-甲氧基-E2；而加入4-OH

6、-E1時，細(xì)胞的培養(yǎng)液中則可檢測到被甲基化+硫酸化的硫酸化4-甲氧基-E1和僅被硫酸化的4-OH-E1。此結(jié)果顯示了兒茶酚-0-甲基轉(zhuǎn)移酶和細(xì)胞液硫酸化轉(zhuǎn)移酶在兒茶酚雌激素代謝中存在著復(fù)雜的相互作用。酶學(xué)分析表明，在已知的人類11種細(xì)胞液硫酸化轉(zhuǎn)移酶中，有五種硫酸化轉(zhuǎn)移酶(SULT1A1，SULT1A2，SULT1A3，SULT1C4和SULT1E1)可以催化兒茶酚雌激素和甲氧基兒茶酚雌激素使之硫酸化，其中以SULT1E1的活性最強(qiáng)。第

7、三部分：五種硝基化化合物(SNP，SNAP，SPONONATE，DETA，SIN-1)在MCF-7和MCF10A細(xì)胞中，均可降低17β-雌二醇硫酸化，并存在濃度依賴性。而他莫昔芬并不降低SIN-1這種作用。 結(jié)論：1、ER、PR陽性者占乳癌患者的多數(shù)，絕經(jīng)后ER、PR陽性率較絕經(jīng)前略有上升，但并無統(tǒng)計學(xué)差異。雌激素受體陰性的乳癌患者仍占乳癌患者的相當(dāng)比例。雌激素受體途徑外的乳癌的發(fā)病機(jī)制有待進(jìn)一步研究。2、硫酸化是兒茶酚雌激素代