牛蒡子苷元抗炎機理及雙氫楊梅素對神經(jīng)細胞保護機制的實驗研究.pdf

1、牛蒡子苷元（Arctigenin）是從菊科兩年生草本植物牛蒡?qū)倥］駻rctium lappaL的干燥成熟果實牛蒡子中分離而來的木脂素類化合物。牛蒡子為我國傳統(tǒng)中藥，有廣泛的生物學(xué)效應(yīng)：抗炎，抗氧化，抗腫瘤，神經(jīng)細胞保護作用。另外，Arctigenin能夠抑制HIV病毒的復(fù)制。在我國，Arctigenin用于治療炎癥有悠久的歷史。以前的研究發(fā)現(xiàn)，Arctigenin能夠抑制LPS誘導(dǎo)的NF-Κb的活性。到目前為止，有關(guān)Arctigenin

2、的報道大都集中在NF-Κb通路。在本研究中，我們探討了Arctigenin抗炎的其他信號機制。
　　 JAK-STAT信號通路能夠被包括細胞因子和生長因子在內(nèi)的許多配體激活，從而介導(dǎo)免疫和炎癥反應(yīng)。JAK家族包括四個成員：JAK1，JAK2，JAK3和TYK2，然而在巨噬細胞中主要以JAK2表達為主。細胞被適當(dāng)?shù)呐潴w刺激后可以誘導(dǎo)受體的寡聚化并且導(dǎo)致局部的JAKs聚集增加，繼而引起他們的磷酸化。JAKs的磷酸化可以引起下游的ST

3、ATs磷酸化。當(dāng)JAKs被磷酸化后，STATs就轉(zhuǎn)錄到核內(nèi)從而調(diào)控相關(guān)靶基因如Inos和COX-2等的表達。
　　 細胞因子源的免疫信號在強度和時間上通常受到嚴密的調(diào)控。JAK-STAT信號的抑制性分子（SOCSs）家族是JAK-STAT信號的負調(diào)控因子。SOCS家族由SOCS1-7，和CIS（細胞因子誘導(dǎo)的Src同源結(jié)構(gòu)域蛋白）組成。SOCS蛋白通過直接和JAK家族蛋白或者磷酸化的酪氨酸殘基相互作用抑制JAK-STAT信號。<

4、br>　　 以前的研究證實Arctigenin具有抗炎作用，但是其抗炎的分子機制仍然不清楚。在本研究中，我們發(fā)現(xiàn)Arctigenin有效地抑制了LPS誘導(dǎo)的Inos（Mrna，蛋白）基因表達及酶活性?？寡仔?yīng)部分上歸功于Arctigenin對ROS依賴的JAK-STAT信號通路的抑制。與抗氧化劑NAC相似，Arctigenin明顯的抑制了STAT1和STAT3的磷酸化，從而阻斷了STAT1和STAT3的入核。利用Inos的熒光素酶基因

5、實驗，我們發(fā)現(xiàn)LPS刺激后，Inos的轉(zhuǎn)錄活性明顯升高。然而Arctigenin預(yù)處理劑量依賴地降低Inos的轉(zhuǎn)錄活性。同時，轉(zhuǎn)染STAT1(Y7F)和STAT3(Y7F)組的Inos的轉(zhuǎn)錄活性也被抑制。這些結(jié)果說明STAT通路是Inos轉(zhuǎn)錄的重要調(diào)控子，從而抑制STAT介導(dǎo)的反應(yīng)基因Inos的產(chǎn)生。為了進一步證實Arctigenin的抗炎效應(yīng)是否由抑制STAT信號所致，我們檢測了STAT介導(dǎo)的反應(yīng)基因IL-1β，IL-6和MCP-1的

6、產(chǎn)生。研究顯示，Arctigenin預(yù)處理劑量依賴地降低LPS誘導(dǎo)的炎癥因子的產(chǎn)生。接下來，我們的研究進一步證實，Arctigenin能夠抑制JAK2的磷酸化，而不能抑制JAK1。另外，SOCSs的誘導(dǎo)表達也是Arctigenin抑制JAK-STAT信號的機制之一。Arctigenin預(yù)處理能夠誘導(dǎo)SOCS3的表達，而SOCS1則不受其影響，這意味著SOCS3有助于Arctigenin抑制JAK-STAT信號通路。這些結(jié)果說明Arcti