泊洛沙姆188(Poloxamer188)對(duì)神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、重型顱腦損傷發(fā)病率100~150/10萬,死亡率高達(dá)30％~50%,其中顱內(nèi)血腫、繼發(fā)腦水腫等因素造成的顱內(nèi)壓增高是主要的原因。雖然標(biāo)準(zhǔn)外傷去大骨瓣減壓術(shù)、脫水藥、亞低溫等治療方法為減少腦水腫,預(yù)防繼發(fā)性腦損傷發(fā)揮重要的作用,但在臨床及實(shí)驗(yàn)中我們也發(fā)現(xiàn)部分惡化型顱內(nèi)壓增高在大骨瓣減壓后仍然繼發(fā)頑固性的腦水腫,如何提高重型顱腦損傷的療效是臨床急需解決的難題,而尋找更好的神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)方法則是防治繼發(fā)性腦損害的關(guān)鍵。泊洛沙姆188是極少可以靜

2、脈注射使用的表面活性劑之一,目前認(rèn)為該類藥物對(duì)細(xì)胞的保護(hù)作用有:阻止部分有害分子蛋白與細(xì)胞膜受體結(jié)合;阻止脂質(zhì)化過氧反應(yīng);對(duì)氧自由基有清除作用。細(xì)胞核因子κB(NF-κB)是在感染、免疫反應(yīng)以及控制細(xì)胞分化和凋亡過程中十分重要的細(xì)胞因子,是參與腦繼發(fā)性炎癥反應(yīng)的一個(gè)重要信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子。有學(xué)者在大鼠腦撞擊傷模型實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)NF-κB活化過程與創(chuàng)傷性腦水腫發(fā)生發(fā)展規(guī)律相符合。因此,對(duì)NF-κB的早期抑制將是治療顱腦損傷的關(guān)鍵因素,是一種新的治療

3、途徑。目前,國(guó)內(nèi)外學(xué)者主要從體外實(shí)驗(yàn)來研究泊洛沙姆188對(duì)細(xì)胞的保護(hù)作用,而從靜脈用藥途徑研究其保護(hù)作用在國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)中尚未見報(bào)告。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用急性硬膜下血腫大鼠模型,分組測(cè)定顱內(nèi)壓與腦組織的含水量,并應(yīng)用RT-PCR方法研究各組NF-κB基因表達(dá)的變化規(guī)律,著重探討顱腦損傷后早期顱內(nèi)壓、腦含水量、NF-κB三者的相關(guān)性,旨在證明泊洛沙姆188對(duì)腦損傷大鼠腦組織產(chǎn)生保護(hù)作用,并為泊洛沙姆188更深入的實(shí)驗(yàn)研究以及臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

4、>　　方法:
　　將大鼠隨機(jī)分成5組:對(duì)照組、模型組、去大骨瓣組、P188治療組、去大骨瓣+P188治療組。按30min、2h、6h、12h時(shí)間點(diǎn)監(jiān)測(cè)顱內(nèi)壓;同樣時(shí)間點(diǎn)取大鼠受壓迫區(qū)腦組織,測(cè)定其含水量;用RT-PCR方法測(cè)定12h各組NF-κB mRNA表達(dá)情況。最后用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法對(duì)比各組間的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析和討論。
　　結(jié)果:
　　1.建立急性硬膜下血腫大鼠模型
　　大體標(biāo)本解剖:血腫均位于硬膜下,血

5、腫的大小與分布略有不同,典型的血腫厚0.5~1.5 mm,大小為8~10 mm,集中分布在大腦凸面。
　　2.監(jiān)測(cè)顱內(nèi)壓
　　注血量0.8 ml。每次注血時(shí)顱內(nèi)壓快速升高,形成尖峰,然后回落,到注血結(jié)束時(shí)形成一鋸齒狀峰值,平均最高(6.52±0.31)mmHg,注血結(jié)束后2h內(nèi)顱內(nèi)壓下降較快,平均下降到(4.59±0.32)mmHg,以后逐漸升高。模型組30min與該組2h、6h時(shí)間段比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),與12h

6、比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;去骨瓣組30min與其他時(shí)間段比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);P188治療組12h時(shí)較同一時(shí)間段模型組有統(tǒng)計(jì)意義(P<0.05);去骨瓣+P188治療組與去骨瓣組接近,均值偏低,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　3.腦組織含水量測(cè)定結(jié)果
　　對(duì)照組腦組織含水量不隨時(shí)間變化。其他各組與時(shí)間成正相關(guān)關(guān)系。模型組12h與各組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P<0.05); P188治療組在12h含水量較去骨瓣組低;去骨瓣+P188治療組與

7、去骨瓣組在12h有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P<0.05)。
　　4.各組腦組織NF-κB基因表達(dá)比較
　　各組與對(duì)照組比P<0.01,去大骨瓣組與P188治療組比P<0.05,P188治療組與P188+去大骨瓣治療組比P>0.05。
　　結(jié)論:
　　1.顱腦損傷早期,顱內(nèi)壓、腦含水量、NF-κB呈正相關(guān)關(guān)系。
　　2.靜脈應(yīng)用P188能夠減少大鼠急性硬膜下血腫模型腦組織含水量,降低顱內(nèi)壓,減少NF-κB的表達(dá),提示顱