利用人類乳牙牙髓干細(xì)胞進(jìn)行牙齒再生的初步研究.pdf

1、本研究嘗試建立人類乳牙牙髓干細(xì)胞(SHED)體外快速擴(kuò)增方法并對(duì)利用SHED進(jìn)行牙齒再生進(jìn)行了初步的探索。主要研究工作包括：SHED的分離培養(yǎng)及初步鑒定，SHED體外快速擴(kuò)增方法的建立，Alu和Pf1地高辛標(biāo)記探針的制備，E10.5鼠胚(小白鼠胚胎發(fā)育第10.5天)第一腮弓上皮和第二腮弓上皮分別與SHED的重組，SHED以50％比例摻入到E13.5鼠胚牙間充質(zhì)細(xì)胞后與E13.5鼠胚牙上皮的重組，以及DNA原位雜交檢測(cè)鼠源組織和人源組織。

2、　　結(jié)果表明，通過分離培養(yǎng)SHED，確定用低密度(1.5cells/cm2)接種更有利于SHED的體外快速擴(kuò)增，通過低密度接種連續(xù)傳代三次也就是大約六周的時(shí)間里，SHED大約擴(kuò)增了1010-1011倍。通過克隆形成效率實(shí)驗(yàn)與礦化結(jié)節(jié)實(shí)驗(yàn)，確定這些擴(kuò)增后的細(xì)胞仍然具有與第一次進(jìn)行低密度擴(kuò)增時(shí)的SHED即起始時(shí)的SHED基本相同的克隆形成能力而且在體外仍能形成礦化結(jié)節(jié)，因此保留了多分化潛能。利用小白鼠為模型建立了一套牙齒異體再生技術(shù)并正在