基質(zhì)衍生細(xì)胞因子-1α誘導(dǎo)內(nèi)源性細(xì)胞歸巢進(jìn)行牙髓再生的研究.pdf

1、目的：通過(guò)在根管內(nèi)植入基質(zhì)衍生細(xì)胞因子-1α（stromal cell derived factor-1α，SDF-1α）組織學(xué)評(píng)價(jià)根管在皮下異位和頜骨原位兩種不同組織生理學(xué)環(huán)境下S DF-1α誘導(dǎo)內(nèi)源性細(xì)胞進(jìn)入根管的趨化能力，并觀察根管內(nèi)再生組織的組織學(xué)結(jié)構(gòu)，探討SDF-1α誘導(dǎo)內(nèi)源性細(xì)胞歸巢并參與牙髓再生的可行性，為非細(xì)胞移植的牙髓再生尋找新途徑。
　　方法：
　　1.皮下異位實(shí)驗(yàn)；臨床收集因正畸需要拔除的前磨牙，制備成

2、長(zhǎng)5mm的牙根段，實(shí)驗(yàn)組牙根段根管內(nèi)植入復(fù)合100ng/mL SDF-1α的多肽水凝膠膠原支架，對(duì)照組牙根段根管內(nèi)僅植入多肽水凝膠膠原支架。選取6-8周齡15只免疫缺陷小鼠（裸鼠），背部作一1cm長(zhǎng)縱行切口，鈍性分離皮下組織，每只裸鼠背部左右兩側(cè)分別各植入一對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組牙根段樣本，6周后取材，對(duì)樣本進(jìn)行組織學(xué)觀察。
　　2.頜骨原位實(shí)驗(yàn)：選取10-
　　12月齡中華田園犬3只，建立犬恒牙無(wú)髓根管模型。每只實(shí)驗(yàn)犬上頜6顆前牙

3、隨機(jī)分成兩組，實(shí)驗(yàn)組根管內(nèi)植入復(fù)合100ng/mL SDF-1α的多肽水凝膠膠原支架，對(duì)照組根管內(nèi)僅植入多肽水凝膠膠原支架，冠部均采用MTA+玻璃離子雙層嚴(yán)密封閉。術(shù)后6周處死動(dòng)物、取材，蘇木精-伊紅（hematine-eosine，HE）染色及免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)DSPP和CD34在再生組織內(nèi)的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：
　　1.收集植入裸鼠背部的牙根段樣本，實(shí)驗(yàn)組根管開(kāi)放端見(jiàn)紅色組織再生，HE染色觀察實(shí)驗(yàn)組牙根段根管內(nèi)有大量

4、細(xì)胞和血管形成，細(xì)胞呈長(zhǎng)梭形成纖維細(xì)胞樣，細(xì)胞形態(tài)清晰，胞核小而細(xì)長(zhǎng)，著色深。根管內(nèi)見(jiàn)管腔形態(tài)不規(guī)則的血管樣組織形成，內(nèi)含紅細(xì)胞，并可見(jiàn)少量的上皮細(xì)胞。
　　對(duì)照組牙根段內(nèi)見(jiàn)均質(zhì)疏松狀物質(zhì)，未見(jiàn)細(xì)胞、血管等組織結(jié)構(gòu)。
　　2.收集實(shí)驗(yàn)犬實(shí)驗(yàn)樣本，HE染色顯微鏡下可見(jiàn)實(shí)驗(yàn)組根管腔內(nèi)生成含大量細(xì)胞和血管的疏松結(jié)締組織。根管內(nèi)細(xì)胞形態(tài)呈長(zhǎng)梭形，類(lèi)似成纖維細(xì)胞樣形態(tài)，胞核小而細(xì)長(zhǎng)，著色深，胞質(zhì)較少，并貼附于天然牙本質(zhì)壁。根管內(nèi)新生血

5、管樣組織可見(jiàn)管腔形態(tài)不規(guī)則，內(nèi)皮細(xì)胞襯于管腔內(nèi)側(cè)。
　　對(duì)照組HE染色顯微鏡下觀察根管腔內(nèi)見(jiàn)均質(zhì)疏松狀物質(zhì)，未見(jiàn)細(xì)胞、血管等組織結(jié)構(gòu)。
　　DSPP抗體免疫組織化學(xué)染色鏡下觀察顯示，實(shí)驗(yàn)組根管內(nèi)牙髓樣新生組織中細(xì)胞胞漿呈棕色陽(yáng)性表達(dá)。
　　CD34抗體免疫組織化學(xué)染色鏡下觀察顯示，實(shí)驗(yàn)組根管內(nèi)血管樣新生組織內(nèi)襯細(xì)胞染色呈棕色陽(yáng)性表達(dá)。
　　結(jié)論：
　　1.根管預(yù)備后管腔內(nèi)植入SDF-1α，在皮下異位環(huán)境下S