葡萄籽提取物體外對(duì)前列腺癌PC-3細(xì)胞作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、葡萄籽提取物(GSE)是從葡萄的種子中提取出來(lái)的一種多酚類物質(zhì)混合物，具有誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的生物和藥理學(xué)活性。 目的：研究GSE對(duì)前列腺癌PC-3細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制及凋亡作用，分析GSE誘導(dǎo)PC-3細(xì)胞的凋亡途徑:觀察GSE對(duì)放射治療PCa的增敏作用。 方法：(1)四唑鹽(MTT)比色法測(cè)定GSE對(duì)PC-3細(xì)胞毒性作用。(2)倒置顯微鏡、透射電鏡觀察GSE對(duì)PC-3細(xì)胞引起的形態(tài)學(xué)改變。(3)碘化丙啶(PI)、吖啶橙(AO)

2、/溴化乙錠(EB)和Annexin Ⅴ-FITC/PI雙染法觀察GSE誘導(dǎo)的PC-3細(xì)胞凋亡作用。(4)western blot探索細(xì)胞凋亡途徑。(5)流式細(xì)胞儀(FCM)檢測(cè)GSE對(duì)放射療法的增敏作用。 結(jié)果：(1)四唑鹽比色法顯示GSE顯著抑制PC-3細(xì)胞生長(zhǎng)。(2)倒置顯微鏡、透射電鏡下可見(jiàn)細(xì)胞形態(tài)改變。(3)PI染色顯示，GSE將PC-3細(xì)胞周期阻滯在G<,0>/G<,1>期；Annexin V-FITC/PI雙染顯示，

3、GSE誘導(dǎo)PC-3細(xì)胞凋亡、壞死；AO/EB染色顯示，熒光顯微鏡下可明顯看到凋亡細(xì)胞、死亡細(xì)胞。(4)western blot顯示GSE通過(guò)caspase-3途徑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。(5)GSE可增加PC-3細(xì)胞對(duì)輻射的敏感性，且改變了輻射后PC-3細(xì)胞的阻滯周期。 結(jié)論：本研究從細(xì)胞和亞細(xì)胞水平研究了GSE對(duì)前列腺癌PC-3細(xì)胞的作用。通過(guò)對(duì)PC-3細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)研究和形態(tài)學(xué)觀察，首次證明了GSE對(duì)人雄激素非依賴性前列腺癌PC-3細(xì)胞