西地那非對兔自體原位肺移植模型肺缺血再灌注損傷保護作用的實驗研究.pdf

1、目的：采用兔自體原位肺移植模型，探討西地那非在肺移植模型中對肺缺血再灌注損傷的保護作用及其可能機制。 方法：選用健康成年家兔20只，體重2.5-3.0Kg(由江蘇大學(xué)醫(yī)學(xué)院動物實驗中心提供)，隨機分為對照組和西地那非組兩組，每組10只。建立兔自體原位肺移植模型，兩組分別用低鉀右旋糖酐液(LPD液)和含有0.7mg/L西地那非的LPD液(LPS液)作肺灌注及保存。各組分別于缺血前、再灌注1h、2h取左下肺靜脈血作血氣分析檢測血氧分

2、壓(PvO2)；各組分別于缺血前、再灌注0.5h、1h、1.5h、2h取左下肺靜脈血，離心，取上清夜，超低溫冰箱保存，待集中檢測超氧化物歧化酶(SOD)活性、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)活性；于再灌注2h時取肺組織標(biāo)本制成100g/L的組織勻漿，離心，取上清液超低溫冰箱保存，待集中檢測丙二醛(MDA)含量、有髓過氧化酶(MPO)活性；術(shù)畢取左下肺相同部位肺組織約0.5g，稱濕重，70℃烘干48h稱干重，計算肺組織濕/干重比(W/D)；

3、另取兩塊左下肺相同部位肺組織光鏡、透射電鏡下觀察組織形態(tài)結(jié)構(gòu)變化。 結(jié)果： 1肺靜脈血氧分壓比較：再灌注后各時點PvO2均較缺血前下降，但西地那非組PvO2明顯高于同時點對照組，兩組結(jié)果有統(tǒng)計學(xué)意義。(P＜0.05)。 2．MDA含量，SOD活性：再灌注后MDA值，西地那非組明顯低于對照組；兩組再灌注后各時點SOD的活性均較缺血前下降，但西地那非組明顯高于同時點對照組，兩組結(jié)果均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。

4、 3．MPO及iNOS活性：兩組再灌注后各時點iNOS表達均較缺血前升高，但西地那非組明顯低于同時點對照組；再灌注后MPO活性，西地那非組明顯低于同時點對照組，兩組結(jié)果均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。 4．肺組織濕/干重比：對照組與西地那非組兔肺組織濕/干重比比較顯示，對照組高于西地那非組，有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。 5．光鏡下肺組織病理改變：西地那非組肺組織泡壁輕度增寬，血管內(nèi)皮完整，血管內(nèi)有血細(xì)胞，對照組肺組

5、織肺泡壁增寬，伴有散在的纖維蛋白沉積，血管內(nèi)皮完整，有大量的中性粒細(xì)胞浸潤，可見較多的肺泡吞噬細(xì)胞，常伴有中性粒細(xì)胞的聚集。 6．電鏡下肺組織病理改變：西地那非組大部分肺泡組織結(jié)構(gòu)正常，Ⅰ、Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞大致正常，部分肺泡上皮細(xì)胞水腫脫落。表面絨毛尚可見，板層小體亦較多見，肺泡腔基本通暢，但少數(shù)肺泡腔內(nèi)有紅細(xì)胞滲出，部分區(qū)域毛細(xì)血管內(nèi)紅細(xì)胞堆積，可見到少量的炎性細(xì)胞浸潤；對照組肺泡間隔內(nèi)毛細(xì)血管淤血明顯，血管擴張，肺泡腔內(nèi)紅細(xì)