AQP4基因多態(tài)性與視神經(jīng)脊髓炎遺傳易感性的相關研究.pdf

1、目的：初步探討AQP4外顯子區(qū)域基因多態(tài)性與我國視神經(jīng)脊髓炎（NMO）患者遺傳易感性的關系，根據(jù)NMO患者單核苷酸多態(tài)性（SNP）位點的相關信息，通過我們建立的不同位點突變的NMO-IgG檢測細胞株進行檢測，從而對不同研究組總體的NMO-IgG抗體滴度水平的差異來分析不同位點的突變可能產(chǎn)生的相應的蛋白質(zhì)的功能變化，進而從AQP4基因水平這一角度來分析探討NMO的發(fā)病機制。
　　方法：對36例符合入選標準的NMO患者以及34例多發(fā)性

2、硬化（MS）、30例腦梗死（CI）、30例正常對照組（NC）為研究對象。用常規(guī)酚/氯仿法從患者及正常對照組全血標本中提取基因組 DNA，應用 PCR擴增 AQP4外顯子區(qū)基因（包括AQP4-exon1和AQP4-exon5），再對PCR產(chǎn)物進行純化及正反雙向測序，再通過與GeneBank公布的人類AQP4基因序列比較，尋找陽性突變位點，并比較各陽性突變位點在NMO、MS、CI、正常對照組中突變率的差異。后通過特異性的定點誘變技術對pEG

3、FP-N1-AQP4質(zhì)粒誘導相應位點的突變生成相應的突變AQP4質(zhì)粒，采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法,將相應的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染進入HEK-293T細胞穩(wěn)定表達后進行NMO-IgG抗體滴度的檢測。應用SPSS11.5統(tǒng)計軟件進行相關數(shù)據(jù)分析。
　　結(jié)果：我們發(fā)現(xiàn)視神經(jīng)脊髓炎NMO組其5號外顯子區(qū)域有單核苷酸多態(tài)性位點4個，突變的位點為 C9414T、G9416C、A9458C、C9524A，而多發(fā)性硬化組，腦梗死組及正常對照組均未發(fā)現(xiàn)相應的SNP位點，同