果蠅抗菌肽diptericin的克隆及在畢赤酵母中的表達(dá).pdf_第1頁
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文檔簡介

1、抗菌肽對許多致病菌,如致病型大腸桿菌、傷寒桿菌、硝酸鹽桿菌等有抗菌作用。而且,部分抗菌肽對一些臨床耐藥致病菌也有良好的抗菌作用。人類真菌病害在目前仍是一個難以解決的問題??拐婢牡陌l(fā)現(xiàn),無疑為該類病害的治療提供了新的思路。傳統(tǒng)抗生素的毒副作用及其耐藥菌株的出現(xiàn),迫使人們?nèi)ふ倚滦偷目刮⑸镏苿?。研究發(fā)現(xiàn)雙翅肽(diptericin)能夠快速的殺死廣譜病原微生物,且作用機理特殊,相對地不具有免疫原性,展示了其在應(yīng)用方面的廣闊前景。

2、 本研究根據(jù)GenBank中提交的序列,以果蠅總DNA為模板,利用PCR技術(shù),擴增出兩端加入了連接接頭的diptericin基因,將接頭處理成粘性末端,與經(jīng)過CpoⅠ及NotⅠ酶切后的pHBM905B表達(dá)載體正確連接。將diptericin基因與分泌型酵母表達(dá)載體pHBM905B重組,構(gòu)建重組酵母表達(dá)載體pHBM905B/diptericin,經(jīng)“三明治”夾心平板篩選及菌落PCR鑒定證明目的基因已整合入酵母染色體中。挑選陽性克隆用甲醇誘

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