利用黑麥6R缺失系物理定位新開發(fā)的6RL特異分子標(biāo)記.pdf

1、S i c h u a n A g r i c u l t u r e U n i v e r s i t yP h ．M ·D i s s e r t a t i o nU s i n g r y e 6 R d e l e t i o nl i n e s t oP h y s i c a l l yL o c a t eN e w P C R - ·B a s e dS p e c i f i cM a r k

2、 e r s o f6 R LB yL i M e n gB i o c h e m i s t r ya n d M o l e c u l a r B i o l o g y( P l a n t M o l e c u l a r B i o l o g y )D i r e c t e d B y P r o ．F uS h u —l a nM a y 2 0 1 6摘 要在小麥的育種工作中，利用遠(yuǎn)緣雜交的方法將黑麥優(yōu)良基因?qū)?/p>

3、小麥已十分普遍，其中黑麥6 R 長臂上就包含有多種優(yōu)良基因。想要有效地利用黑麥6 R 染色體長臂上的有利基因，首先需要準(zhǔn)確地鑒定小麥背景中的黑麥6 R L 染色體臂或者其片段。本實驗基于S L A F —s e q ( S p e c i f i cL e n g t h A m p l i f i e dF r a g m e n tS e q u e n c i n g ) 技術(shù)開發(fā)出了一些6 R L 特異分子標(biāo)記，并利用黑麥6 R

4、 和6 R L 缺失系將這些引物進(jìn)行染色體區(qū)段的定位，同時利用3 套小麥。黑麥單體或二體附加系對這些標(biāo)記進(jìn)行了多態(tài)性檢測，獲得如下研究結(jié)果：鑒定出了一套來自普通小麥綿陽1 1 ( T r i t i c u ma e s t i v u m L ．) ×黑麥K u s t r o ( S e c a l e c e r e a l eL ．) 的單體附加系M A 1R K u ．7 R 妯、6 R S 單端體附加系M T A

5、6 R S K u 、6 R L 單端體附加系M T A 6 R L K u 、6 R 缺失系D E L 6 R K u 和6 R L 缺失系D E L 6 R L ‰。利用S L A F ．s e q 技術(shù)開發(fā)出了3 0 0 對新的黑麥K u s t r o 6 R L 特異引物；利用M T A 6 R S 鳳、M T A 6 R L K u 、D E L 6 R K u 和D E L 6 R L K “將這3 0 0 對引物分別定位

6、到黑麥6 R L 的4 個區(qū)段。將黑麥6 R L 上的抗白粉病基因定位于6 R L 的2 ．3 和2 ．5 之間的斷裂點到6 R L 端部區(qū)域，并且有1 2 7 個分子標(biāo)記被定位到了該區(qū)段上。本實驗新開發(fā)的3 0 0 對6 R L 特異引物在不同黑麥之間，有9 5 對引物表現(xiàn)出了多態(tài)性，一定程度上可以用于研究不同來源6 R L 的遺傳多樣性。本實驗所開發(fā)的分子標(biāo)記可以用于檢測小麥背景中的黑麥6 R L 小片段，對于將黑麥6 R L 上的