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1、目的:探討紅細(xì)胞生成素(EPO)對(duì)高糖誘導(dǎo)下的腎小管上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化的影響,并初步探尋其中的有關(guān)機(jī)制。 方法:體外培養(yǎng)正常人腎小管上皮細(xì)胞株(HK-2細(xì)胞)。將細(xì)胞隨機(jī)分為5組:正常對(duì)照組(NC)、滲透濃度對(duì)照組(OC)、高糖組(HG)、高糖+EPO(5 U/mL)組(E1)和高糖+EPO(10 U/mL)組(E2),培養(yǎng)72 h后收集細(xì)胞提取RNA并制作細(xì)胞爬片。逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法(RT-PCR)檢測(cè)各組細(xì)胞α-平滑肌肌動(dòng)蛋白
2、(α-SMA)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)、Smads信號(hào)蛋白2(Smad2)及整合素連接激酶(ILK)mRNA表達(dá)的改變,細(xì)胞免疫熒光法檢測(cè)細(xì)胞TGF-β1及α-SMA蛋白表達(dá)的改變。 結(jié)果:①RT-PCR顯示,高糖組HK-2細(xì)胞α-SMA、TGF-β1、Smad2、ILK的mRNA表達(dá)較正常對(duì)照組或滲透濃度對(duì)照組明顯增高(P<0.01),而E1組和E2組上述指標(biāo)的表達(dá)較高糖組均顯著降低(P<0.01),且E2組較E1組
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