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文檔簡介
1、目的:
探討大黃素對人白蛋白誘導(dǎo)的人近端腎小管上皮細(xì)胞(HK-2)發(fā)生上皮細(xì)胞-間充質(zhì)轉(zhuǎn)分化的影響,以及該過程是否存在對TGF-β1/Smad信號通路的調(diào)控而發(fā)揮作用。
方法:
以體外培養(yǎng)的HK-2細(xì)胞為研究對象,試驗分為空白對照組、大黃素對照組、白蛋白誘導(dǎo)組、大黃素干預(yù)組。HK-2細(xì)胞在上述各處理因素下分別培養(yǎng)0、12、24、48h。在倒置相差顯微鏡下觀察及比較細(xì)胞形態(tài)差異;RT-PCR檢測α
2、-SMA、E-cadherin、TGF-β1、Smad2、FN mRNA的表達(dá)水平變化。
結(jié)果:
5mg/ml人白蛋白刺激HK-2細(xì)胞48h內(nèi),光鏡下可見細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變,胞體變細(xì)長,細(xì)胞之間間隙增大;RT-PCR檢測α-SMA、FGF-β1、Smad2、FNmRNA的表達(dá)水平逐漸增高,E-cadherin mRNA的表達(dá)水平逐漸減少,均較空白對照組有顯著差異(P<0.01)。而使用20μg/ml大黃素和人白
3、蛋白共同孵育的HK-2細(xì)胞,其形態(tài)改變與白蛋白誘導(dǎo)組相似,但改變程度較??;RT-PCR檢測α-SMA、TGF-β1、Smad2、FN mRNA的表達(dá)隨時間延長亦逐漸增強,E-cadherinmRNA仍則逐漸減弱,但大黃素干預(yù)組上述指標(biāo)的表達(dá)顯著弱于白蛋白誘導(dǎo)組(P<0.01)。
結(jié)論:
一定濃度的人白蛋白可以誘導(dǎo)體外培養(yǎng)的HK-2細(xì)胞α-SMA、FGF-β1、Smad2、FN mRNA的表達(dá)上調(diào),下調(diào)E-ca
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