TGF-β1和AQP2在氟中毒大鼠的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：用腹腔注射氟化鈉水溶液的方法建立大鼠急性氟中毒模型，通過(guò)測(cè)量尿氟和骨氟含量，檢測(cè)各組大鼠體重差、腎重/體重比、尿常規(guī)及腎功能變化，應(yīng)用免疫組化方法檢測(cè)腎臟集合系統(tǒng) TGF-β1和AQP2分布和含量，觀察大鼠腎組織結(jié)構(gòu)病理學(xué)改變，研究腎臟氟中毒的損傷機(jī)制。
　　方法：選擇健康成年SD（Sprague-Dawley）大鼠36只，雌雄各半，隨機(jī)分為三組：①對(duì)照組12只；②低氟染毒組12只；③高氟染毒組12只。雌雄各半。采用腹腔注射

2、方式，每?jī)扇找淮危凑兆⑸鋭┝糠謩e分組為：高氟組12只（注射氟劑量為20mg/kg），低氟組12只（注射氟劑量為5mg/kg），對(duì)照組12只（注射生理鹽水5ml/kg）。無(wú)氟飲食，每日早晚八時(shí)規(guī)律喂食兩次，自由飲水，分別于飼養(yǎng)后30天剖殺，采用股動(dòng)脈放血處死法，所剖殺大鼠均由同一術(shù)者完成，測(cè)定各組大鼠體重差、腎重/體重比，氟中毒大鼠尿常規(guī)變化，氟中毒大鼠腎功能變化。離子電極法測(cè)量尿氟濃度，測(cè)量骨氟濃度，應(yīng)用免疫組化方法檢測(cè)腎臟 TGF-

3、β1和AQP2分布和含量，應(yīng)用HE染色方法顯微鏡下觀察大鼠腎組織結(jié)構(gòu)病理學(xué)改變。實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(-X±S)表示，用SPSS12.5軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析處理，檢驗(yàn)水準(zhǔn)取0.05。
　　結(jié)果：1.大鼠中毒表現(xiàn)：牙齒呈黃白相間的氟中毒體癥，且隨著染氟劑量的增加，牙齒變化明顯，隨染氟劑量的增高，尿氟和骨氟濃度增高，各組數(shù)據(jù)兩兩比較，差異均有顯著性（P<0.05）。
　　2.一般指標(biāo)檢測(cè)：測(cè)定各組大鼠體重差、腎重/體重比，氟

4、中毒大鼠尿常規(guī)變化，氟中毒大鼠腎功能變化，各組間未有明顯差異，（P＞0.05）無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　3.氟中毒大鼠腎組織形態(tài)學(xué)變化
　　HE染色：與對(duì)照組比較，染氟大鼠主要表現(xiàn)為腎小管上皮細(xì)胞水腫、滲出、壞死，細(xì)胞間界限不清，且隨著染氟濃度增高，損傷改變加重，腎小球和腎間質(zhì)改變輕微。
　　4. TGF-β1和AQP2在大鼠腎組織中的表達(dá)與分布
　　TGF-β1在腎小管上皮細(xì)胞的胞質(zhì)中表達(dá)，隨著染毒濃度增高，表達(dá)增強(qiáng)

5、，與對(duì)照組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；
　　AQP2在集合小管的胞質(zhì)中陽(yáng)性表達(dá)，隨著染毒濃度增高，表達(dá)增強(qiáng)，與對(duì)照組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；
　　結(jié)論：
　　1.表明通過(guò)腹腔注射氟化鈉氟大鼠制造氟中毒腎損傷動(dòng)物模型辦法可靠；
　　2.氟中毒可引起腎結(jié)構(gòu)損傷，且主要表現(xiàn)為腎小管上皮細(xì)胞損傷；
　　3.氟中毒TGF-β1主要在大鼠腎臟腎小管表達(dá)，可能是腎小管損傷與修復(fù)過(guò)程中的一對(duì)