粉防己堿對(duì)成癮大鼠腦細(xì)胞保護(hù)作用研究.pdf

1、目的:觀察粉防己堿(Tetrandrine，Tet)片對(duì)苯巴比妥藥物成癮大鼠的腦細(xì)胞的作用并闡述其可能機(jī)制。
　　方法:將大鼠隨機(jī)分成空白組、苯巴比妥成癮模型組、粉防己堿高劑量干預(yù)組、粉防己堿中劑量干預(yù)組、粉防己堿低劑量干預(yù)組共5組。除空白組外，其余4組均用劑量遞增的苯巴比妥片摻入大鼠食物喂食大鼠，粉防己堿高、中、低劑量3個(gè)組的大鼠每日分別以劑量(31.25mg/kg、18.75mg/kg、6.25mg/kg)的粉防己堿混懸液予以

2、灌胃（空白組與模型組予以灌胃同等體積的生理鹽水）。用此法喂養(yǎng)大鼠后的第46天稱(chēng)取大鼠體重、觀察大鼠反應(yīng)并給予戒斷癥狀評(píng)分，然后用不含苯巴比妥的正常食物代替含有苯巴比妥的食物引起大鼠自然戒斷，食物更換后每12個(gè)小時(shí)稱(chēng)取大鼠體重一次，每8個(gè)小時(shí)觀察其大鼠反應(yīng)并給予戒斷癥狀評(píng)分一次;戒斷72小時(shí)后體重和戒斷癥狀觀察結(jié)束，用4％多聚甲醛灌注各組中部分大鼠的腦部，灌注結(jié)束后處死大鼠取其腦組織做成石蠟塊標(biāo)本并切片，用H&E染色的方式將切片染色，觀察

3、其額葉部位腦細(xì)胞形態(tài)變化;用免疫組化染色的方式檢測(cè)細(xì)胞凋亡調(diào)控因子Bcl-2、Bax在腦組織額葉部位的陽(yáng)性表達(dá)情況;用RT-PCR法檢測(cè)各組大鼠中未用多聚甲醛灌注腦部的剩余大鼠腦組織額葉部位Bcl-2、BaxmRNA表達(dá)水平;用Western-blotting法檢測(cè)各組大鼠中未用多聚甲醛灌注腦部的剩余大鼠腦組織額葉部位Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)果:與模型組相比，空白組和粉防己堿高、中、低劑量組的戒斷癥狀評(píng)分，體重減輕

4、程度都低于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05;與模型組相比，空白組和粉防己堿高、中、低劑量組的腦細(xì)胞形態(tài)相對(duì)完好;與模型組相比，粉防己堿高、中、低劑量組額葉部位Bcl-2陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)增多，Bax陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05;與模型組相比，粉防己堿高、中、低劑量組均能顯著升高Bcl-2 mRNA相對(duì)表達(dá)(1.38±0.19、1.16±0.14、0.96±0.09比0.63±0.06)，降低Bax mRNA相對(duì)表達(dá)(0.

5、55±0.06、0.85±0.10、1.06±0.12比1.33±0.11)，提高Bcl-2 mRNA表達(dá)/Bax mRNA表達(dá)的比率;與模型組相比，粉防己堿高、中、低劑量組均能顯著升高Bcl-2蛋白相對(duì)表達(dá)(1.91±0.20、1.57±0.14、1.12±0.29比0.95±0.12)，降低Bax蛋白相對(duì)表達(dá)(0.79±0.06、0.93±0.10、1.16±0.22比2.52±0.21)，升高Bcl-2蛋白表達(dá)/Bax蛋白表達(dá)的比