粉防己堿對(duì)野百合堿誘導(dǎo)的肺動(dòng)脈高壓大鼠治療作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的:
　　肺動(dòng)脈高壓是一種致殘、致死率較高的心血管疾病，治療方法多樣但療效欠佳。粉防己堿是一種從植物粉防己根中提取出的效果良好的鈣離子通道阻滯劑，能夠通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞膜上及細(xì)胞內(nèi)的多種類型鈣離子通道和鉀離子通道，對(duì)心血管系統(tǒng)電生理學(xué)產(chǎn)生重要影響。以往研究發(fā)現(xiàn)粉防己堿具有抗高血壓、抗炎癥反應(yīng)并通過(guò)干預(yù)多種細(xì)胞內(nèi)分子信號(hào)機(jī)制達(dá)到抑制異常細(xì)胞增殖和促進(jìn)凋亡等作用，但目前尚不清楚其是否具有治療或逆轉(zhuǎn)肺動(dòng)脈高壓的效果。本研究以野百合堿誘導(dǎo)的肺

2、動(dòng)脈高壓大鼠模型為研究對(duì)象，探討分析粉防己堿對(duì)肺動(dòng)脈高壓的治療效果及其作用機(jī)理。
　　方法:
　　實(shí)驗(yàn)選取48只雄性SD大鼠作為研究對(duì)象并隨機(jī)分成4組，對(duì)照組大鼠一次性腹腔注射溶媒溶液（即5％乙醇與生理鹽水2∶8混合液），其余三組大鼠一次性腹腔注射野百合堿以造成肺動(dòng)脈高壓模型。4周之后對(duì)照組大鼠給予溶媒溶液灌胃，模型組大鼠分別給予溶媒溶液、粉防己堿溶液、伐地那非溶液灌胃治療3周，后進(jìn)行如下處理:
　　1.測(cè)量各組大鼠肺

3、動(dòng)脈壓，后抽血處死大鼠，分離出大鼠心臟，測(cè)量右心室肥厚指數(shù)，并保留右室標(biāo)本做心肌細(xì)胞病理學(xué)檢測(cè);
　　2.多聚甲醛保存肺組織標(biāo)本，制作肺組織石蠟切片，相應(yīng)染色后使用光學(xué)顯微鏡觀察肺組織中小動(dòng)脈血管各層組織結(jié)構(gòu)的病理改變;
　　3.戊二醛保存肺組織標(biāo)本，制作肺組織石蠟切片，后期使用透射電子顯微鏡觀察肺組織中小動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)病理變化;
　　4.液氮保存肺組織標(biāo)本，后期將肺組織制成組織勻漿，檢測(cè)對(duì)調(diào)控肺組織起重要作

4、用的一氧化氮信號(hào)通路中的關(guān)鍵因子誘導(dǎo)型一氧化氮合酶和1型環(huán)磷酸鳥苷依賴性蛋白激酶G這兩種細(xì)胞內(nèi)信號(hào)分子的表達(dá)情況變化;
　　5.將多聚甲醛保存的肺組織制成石蠟切片，采用免疫組織化學(xué)的方法定位誘導(dǎo)型一氧化氮合酶和1型環(huán)磷酸鳥苷依賴性蛋白激酶G兩種細(xì)胞內(nèi)信號(hào)分子在肺組織中的具體表達(dá)位置和大體表達(dá)量;
　　6.液氮碾磨冰凍肺組織制成組織勻漿，檢測(cè)勻漿液中部分氧化，抗氧化指標(biāo)表達(dá)變化情況，主要包括超氧化物歧化酶、谷胱甘肽、丙二醛和過(guò)

5、氧化氫酶四種因子。比較并分析各項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果。
　　結(jié)果:
　　1.同肺動(dòng)脈高壓模型組大鼠相比，粉防己堿治療組大鼠肺動(dòng)脈平均壓下降明顯，右心室肥厚情況得到顯著改善（P＜0.05）;
　　2.粉防己堿治療組大鼠肺中小動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞的功能障礙得到明顯改善，并顯著抑制了平滑肌細(xì)胞的異常增殖和肺組織中小動(dòng)脈血管壁纖維化;
　　3.粉防己堿治療后明顯上調(diào)了一氧化氮信號(hào)通路中1型環(huán)磷酸鳥苷依賴性蛋白激酶G的表達(dá)量，同時(shí)下調(diào)了誘

6、導(dǎo)型一氧化氮合酶的表達(dá)水平（P＜0.05）;
　　4.粉防己堿治療組大鼠肺組織氧化-抗氧化失衡情況得到了較大的改善，其中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽和過(guò)氧化氫酶的表達(dá)量明顯下降，丙二醛表達(dá)量明顯升高（P＜0.05）。
　　結(jié)論:
　　粉防己堿能降低野百合堿誘導(dǎo)的肺動(dòng)脈高壓大鼠平均肺動(dòng)脈壓力升高、緩解肺血管和右心室結(jié)構(gòu)重構(gòu)，其機(jī)制可能同調(diào)節(jié)一氧化氮信號(hào)通路中重要的信號(hào)蛋白誘導(dǎo)型一氧化氮合酶和1型環(huán)磷酸鳥苷依賴性蛋白激酶G的表