微囊化許旺細(xì)胞移植脊髓損傷大鼠bFGF表達(dá)及后肢運(yùn)動(dòng)功能變化.pdf

1、目的:細(xì)胞移植是目前脊髓損傷治療的重要研究方向。在脊髓半橫段損傷后的大鼠,移植具有免疫隔離效應(yīng)的兔許旺細(xì)胞微囊,通過(guò)觀察大鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子表達(dá)及后肢運(yùn)動(dòng)功能的變化,探討微囊化許旺細(xì)胞移植對(duì)脊髓再生的影響。
　　 方法:在無(wú)菌條件下,取家兔坐骨神經(jīng)用雙酶消化法制成許旺細(xì)胞懸液后,再用氣體噴入法制成許旺細(xì)胞微囊。同法制備不包被許旺細(xì)胞的空囊。80只SD大鼠隨機(jī)分為4組:細(xì)胞組(N=25)、空囊組(N=25)、微囊組(N=25

2、)和正常組(N=5)。其中,前三組建立第10胸椎脊髓右半橫斷損傷模型,分別于損傷處植入明膠海綿吸附的10μL許旺細(xì)胞懸液(細(xì)胞組)、10μL空囊(空囊組)、10μL許旺細(xì)胞微囊(微囊組);正常組不做任何干預(yù)。采用BBB評(píng)分測(cè)定大鼠后肢運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)情況和制作脊髓石蠟切片觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。術(shù)后第1、3、7、14、28 d大鼠4％多聚甲醛灌注后,細(xì)胞組、空囊組、微囊組截取損傷平面脊髓;正常組取相應(yīng)部位脊髓,四組大鼠脊髓組織均制成常規(guī)石蠟切片。切片

3、通過(guò)HE染色和尼氏染色行病理學(xué)檢查,并做免疫組織化學(xué)染色,結(jié)合圖像分析觀察堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子在脊髓損傷部位的表達(dá)變化。
　　 結(jié)果:造模后大鼠右后肢即刻出現(xiàn)癱瘓,BBB評(píng)分為0。術(shù)后隨時(shí)間延長(zhǎng)各組動(dòng)物后肢運(yùn)動(dòng)功能均有不同程度的恢復(fù),但都未達(dá)到正常水平。移植后第7、14、28天微囊組大鼠后肢運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)較快,BBB評(píng)分優(yōu)于細(xì)胞組和空囊組(P＜0.05或P＜0.01)。病理學(xué)檢查,移植后第3天,各組脊髓損傷區(qū)有大量巨噬細(xì)胞和白細(xì)

4、胞浸潤(rùn),同時(shí)膠質(zhì)細(xì)胞增生,但與細(xì)胞組、空囊組比較,微囊組細(xì)胞浸潤(rùn)程度較輕,膠質(zhì)細(xì)胞增生明顯。材料移植后第7天,微囊組大量膠質(zhì)細(xì)胞增生,已無(wú)白細(xì)胞和巨噬細(xì)胞浸潤(rùn),而細(xì)胞組、空囊組仍有白細(xì)胞和巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)。堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)主要見(jiàn)于神經(jīng)元細(xì)胞的胞漿和膠質(zhì)細(xì)胞的胞核內(nèi)。移植后第1、3、7天,膠質(zhì)細(xì)胞主要在脊髓損傷附近處表達(dá),其中第3天表達(dá)量最大;第14天在神經(jīng)元細(xì)胞的胞漿內(nèi)可見(jiàn)堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子表達(dá),微囊組表達(dá)程度明顯高于