微囊化異體坐骨神經(jīng)組織細胞移植對大鼠脊髓損傷后c-fos表達的影響.pdf

1、目的：將具有免疫隔離效應(yīng)的海藻酸鈉微囊包被同種異體雪旺細胞，并進行移植用于脊髓損傷的治療研究，通過免疫組織化學(xué)方法觀察脊髓損傷后進行微囊化神經(jīng)組織細胞移植c-fos表達的變化。 方法：無菌條件下取大鼠雙側(cè)坐骨神經(jīng)制成組織細胞懸液，低速離心后與1.5％海藻酸鈉溶液混合并噴入20mmol/L的氯化鋇溶液中制成微囊化坐骨神經(jīng)組織細胞。95只成年Sprague-Dawley（SD）大鼠隨機分為4組：微囊組（A組）、細胞懸液組（B組）、單

2、純損傷組（C組）和假手術(shù)組（D組）：假手術(shù)組為5只；其他3組每組各30只，大鼠于T8右側(cè)半橫斷損傷后，分別植入明膠海綿吸附的微囊化坐骨神經(jīng)組織細胞、明膠海綿吸附的坐骨神經(jīng)組織細胞懸液及明膠海綿，術(shù)后6h、12h、24h、3d、7d、14d，每組各5只大鼠，4％多聚甲醛經(jīng)心-升主動脈灌注后取出損傷區(qū)尾側(cè)脊髓約2節(jié)段和相應(yīng)部位的脊神經(jīng)節(jié)，D組大鼠則取相應(yīng)部位的脊髓和脊神經(jīng)節(jié)。石蠟切片后行免疫組織化學(xué)染色，結(jié)合圖像分析技術(shù)觀察c-fos在脊髓

3、后角和前角和脊神經(jīng)節(jié)（dorsalrootganglion，DRG）內(nèi)含量的變化。 結(jié)果：脊髓半橫斷損傷后6h時，c-fos陽性神經(jīng)元數(shù)升高，同時陽性細胞累積光密度（IOD）值也升高，c-Fos蛋白可見在灰質(zhì)表達增多，前角和后角都有陽性細胞表達但主要出現(xiàn)在后角。損傷后12h開始出現(xiàn)下降，隨后在24h又出現(xiàn)升高，都高于假手術(shù)組（4.05±0.38）。單損組的c-fos陽性細胞在3d后開始減少，術(shù)后7d、14d單損組與假手術(shù)組比較無

4、明顯意義（P<0.05）。微囊組的c-fos表達在6h、12h、24h、3d都明顯低于單損組和細胞懸液組，其差別有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。細胞組在6h和12h與單損組比較有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。各組在7d和14d無統(tǒng)計意義（P>0.05）。 結(jié)論：（1）微囊化細胞移植能降低脊髓c-fos的表達，對脊髓半橫斷損傷后的神經(jīng)元有保護作用。（2）微囊化雪旺細胞移植可能通過使c-fos的表達下調(diào)而在一定程度上降低了脊髓的繼發(fā)性損