新型核苷類似物FNC對(duì)非霍奇金淋巴瘤細(xì)胞侵襲力影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景和目的：
　　惡性淋巴瘤(malignantlymphoma，ML)是淋巴結(jié)和（或）結(jié)外部位淋巴組織的免疫細(xì)胞腫瘤，按照病理類型分為霍奇金淋巴瘤（Hodgkin'slymphoma，HL）和非霍奇金淋巴瘤（non-Hodgkin'slymphoma，NHL）。NHL約占惡性淋巴瘤總數(shù)的90％左右，其中70％為B細(xì)胞型(B-NHL)?；瘜W(xué)治療在侵襲性NHL的綜合治療中占主導(dǎo)地位，但目前的療效還不理想，因此迫切需要療效更好、副作用

2、更小的抗淋巴瘤藥物。
　　2'-氟-4'疊氮-核苷類似物(FNC)為新型核苷類化合物，由鄭州大學(xué)化學(xué)與分子工程學(xué)院合成，已申請(qǐng)國(guó)家發(fā)明專利，專利號(hào)為ZL201010506595.X。前期的研究結(jié)果顯示FNC對(duì)幾種B-NHL細(xì)胞有明顯的增殖抑制作用，表現(xiàn)出很好的開發(fā)潛力。為了對(duì)其進(jìn)行更深入的研究，本試驗(yàn)選用兩種高度侵襲性B-NHL細(xì)胞株Raji（伯基特淋巴瘤）和Jeko-1（套細(xì)胞淋巴瘤），研究新型核苷類化合物FNC對(duì)NHL細(xì)胞侵襲

3、力的影響及其機(jī)制。
　　方法：
　　用不同濃度的FNC處理Raji（0.035、0.175、0.875、4.375μmol·L-1）、Jeko-1（0.0016、0.008、0.04、0.2μmol·L-1）細(xì)胞24小時(shí)后，用改良噻唑蘭(MTT)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)FNC對(duì)上述兩種細(xì)胞粘附力的影響;用Transwell小室實(shí)驗(yàn)檢測(cè)FNC對(duì)上述兩種細(xì)胞遷移侵襲能力的影響;用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)和免疫印跡實(shí)驗(yàn)(Western

4、Blot)檢測(cè)FNC對(duì)上述兩種細(xì)胞β-鏈蛋白(β-catenin)、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)、E-鈣粘蛋白(E-cadherin)、基質(zhì)金屬蛋白酶2(matrixmetalloproteinase2，MMP-2)、基質(zhì)金屬蛋白酶9(matrixmetalloproteinase9，MMP-9)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascularendothelialgrowthfactor，VEGF)mRNA和蛋白表達(dá)水平的影響。
　

5、　結(jié)果：
　　(1)FNC作用于Raji和Jeko-1細(xì)胞24h后，各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞的粘附力均顯著降低，且呈明顯的劑量依賴性;
　　(2)FNC作用于Raji和Jeko-1細(xì)胞24h后，各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞的遷移力和侵襲力均顯著降低，且呈明顯的劑量依賴性;
　　(3)隨著FNC濃度的增加，Raji細(xì)胞和Jeko-1細(xì)胞中β-catenin、MMP-2、MMP-9、VEGF基因及蛋白的表達(dá)降低，GSK-3β、E-cadherin基因