滋養(yǎng)細胞疾病中Cyclin E及其相關(guān)蛋白表達的研究.pdf

1、目的： 探討CyclinE、CDK-2、P27KIP1以及P21WAF1/CIP1在正常胎盤組織、葡萄胎和滋養(yǎng)細胞腫瘤組織中的表達，研究上述指標表達水平的相關(guān)性以及與妊娠滋養(yǎng)細胞疾病的關(guān)系；觀察藥物全反式維甲酸對人絨毛膜癌細胞系JEG-3細胞的增殖以及上述細胞周期調(diào)控因子mRNA表達的影響。 方法： 采用鏈霉素—過氧化物酶(即S-P法)免疫組化方法檢測30例正常胎盤組織、38例葡萄胎組織和9例滋養(yǎng)細胞腫瘤組織(侵

2、蝕性葡萄胎8例，絨癌1例)中CyclinE、CDK-2、P27KIP1和P21WAF1/CIP1的表達；不同濃度ATRA作用于人絨毛膜癌JEG-3細胞，采用MTT方法檢測藥物對細胞的增殖抑制作用；利用RT-PCR方法檢測藥物作用前后細胞中CyclinE、CDK-2、P27KIP1和P21WAF1/CIP1mRNA表達的改變。 結(jié)果： 1.CyclinE、CDK-2在葡萄胎和滋養(yǎng)細胞腫瘤組織中的表達明顯高于正常胎盤組織(P

3、<0.05)，CyclinE、CDK-2在滋養(yǎng)細胞腫瘤與葡萄胎組織以及惡性轉(zhuǎn)變與未惡變的葡萄胎組織中的表達均無統(tǒng)計學差異(P>0.05)；P27KIP1和P21WAF1/CIP1在滋養(yǎng)細胞腫瘤中的表達顯著低于葡萄胎和正常胎盤組織(P<0.05)，P27KIP1和P21WAF1/CIP1在發(fā)生惡性轉(zhuǎn)變的葡萄胎組織中的表達顯著低于未發(fā)生惡變者(P<0.05)。 2.對滋養(yǎng)細胞疾病中上述四種蛋白的強陽性表達進行Spearman等級相關(guān)

4、性統(tǒng)計分析，結(jié)果顯示，CyclinE高表達與P27KIP1和P21WAF1/CIP1的低表達呈負相關(guān)；CyclinE與CDK-2的高表達呈正相關(guān)；P27KIP1和P21WAF1/CIP1的低表達呈正相關(guān)，各組相關(guān)性比較具統(tǒng)計學差異(P<0.05)。CDK-2表達隨P27KIP1和P21WAF1/CIP1的表達降低呈增高趨勢，但無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 3.以血β-HCG值100000mIU/ml為界將葡萄胎患者分為兩組，在

5、血β-HCG≥100000mIU/ml患者中，CyclinE和CDK-2表達呈增高趨勢；P27KIP1和P21WAF1/CIP1的表達呈減低趨勢，但均無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。 4.以40歲為界將葡萄胎組患者分為兩組，CyclinE和CDK-2的表達在年齡大于40歲的葡萄胎患者中的表達呈增高趨勢，P27KIp1、P21WAF1/CIP1表達呈減低趨勢，但均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 5.ATRA能夠有效抑制人絨毛

6、膜癌細胞系JEG-3細胞的增殖，且其對JEG-3細胞的增殖抑制作用在一定范圍內(nèi)呈藥物濃度和時間依賴性。 6.ATRA作用于絨癌細胞系JEG-3細胞后，CyclinEmRNA的表達明顯下降(P<0.05)；P27KIP1和P21WAF1/CIP1mRNA的表達則顯著升高(P<0.05)；CyclinE的表達下調(diào)以及P27KIP1和P21WAF1/CIP1mRNA的表達上調(diào)均具有藥物濃度依賴性，即隨藥物濃度升高，CyclinE下調(diào)以

7、及P27KIP1和P21WAF1/CIP1mRNA的表達上調(diào)越明顯，上述三個指標的改變在ATRA各濃度組與對照組之間以及各濃度組兩兩之間比較，均具有統(tǒng)計學差異(P<0.05)。CDK-2mRNA的表達在藥物作用前后無明顯統(tǒng)計學差異的改變(P>0.05)。 結(jié)論： 1.CyclinE/CDK-2復合物及其抑制蛋白P27KIP1和P21WAF1/CIP1的異常表達參與了滋養(yǎng)細胞腫瘤的發(fā)生發(fā)展； 2.P27KIP1和P

8、21WAF1/CIP1有可能成為預測葡萄胎惡變的有效標記物。 3.CyclinE、CDK-2、P27KIP1和P21WAF1/CIP1的表達水平與葡萄胎患者的年齡及清宮術(shù)前血β-HCG水平均無關(guān)。 4.ATRA可通過下調(diào)CyclinEmRNA的表達、上調(diào)P27KIP1和P21WAF1/CIP1mRNA的表達有效抑制人絨毛膜癌JEG-3細胞的增殖，且在一定范圍呈藥物濃度依賴性。因此，細胞周期蛋白E及其相關(guān)蛋白有可能為滋養(yǎng)細