動(dòng)脈粥樣硬化時(shí)血管內(nèi)皮細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)和細(xì)胞間粘附分子-1表達(dá)的變化及阿托伐他汀治療的影響.pdf

1、本研究在采用食餌法成功建立家兔AS模型的基礎(chǔ)上，對(duì)動(dòng)脈血管標(biāo)本進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察，通過觀測(cè)實(shí)驗(yàn)性家兔動(dòng)脈粥樣硬化(AS)形成過程中血管內(nèi)皮細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)及細(xì)胞間粘附分子(ICAM)-1表達(dá)的變化，以闡明ICAM-1在AS形成中的作用，同時(shí)觀察阿托伐他汀對(duì)食餌法誘導(dǎo)的血管ICAM-1表達(dá)的影響，探討他汀類藥物的部分非調(diào)脂抗動(dòng)脈粥樣硬化機(jī)制。 研究方法：新西蘭純種雄性大白兔60只，按清潔級(jí)動(dòng)物分籠喂養(yǎng)，體重1.8-2.4Kg,隨機(jī)分為3組

2、，即正常對(duì)照組(C組)20只：喂飼普通顆粒兔飼料；AS模型組(AS組)20只：予高脂飲食喂養(yǎng)；阿托伐他汀組(AT組)20只：高脂飲食喂養(yǎng)，同時(shí)予阿托伐他汀(4mg/kg.d)灌胃。分別于實(shí)驗(yàn)開始及第2、4、6、8周末5個(gè)時(shí)間點(diǎn)，記錄兔體重。于實(shí)驗(yàn)開始隨機(jī)抽取20只兔，空腹抽取耳沿靜脈血行有關(guān)化驗(yàn)，并于試驗(yàn)的2、8周末隨機(jī)處死每組兔10只，抽取下腔靜脈血，測(cè)定血脂、轉(zhuǎn)氨酶、磷酸肌酸激酶及血清可溶性ICAM-1含量，同時(shí)取胸主動(dòng)脈弓處血管制

3、作石蠟切片，分別進(jìn)行常規(guī)HE染色、ICAM-1免疫組化染色，并用圖像分析儀定量測(cè)量主動(dòng)脈內(nèi)膜/中膜厚度比值；取胸主動(dòng)脈中段標(biāo)本平鋪固定于玻片上，用原子力顯微鏡觀察內(nèi)皮細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的變化。 研究結(jié)果： 1.C組兔主動(dòng)脈無(wú)斑塊形成。AS組及AT組動(dòng)脈斑塊均隨時(shí)間延長(zhǎng)而有所加大、增厚。但AT組病變較同期同部位的AS組輕。 2.超微結(jié)構(gòu)變化：正常主動(dòng)脈中段血管內(nèi)皮細(xì)胞平行排列，與血管長(zhǎng)軸同向，細(xì)胞呈梭形，細(xì)胞連接處為大小

4、基本一致的球狀結(jié)構(gòu)，密集排列成鋪路石狀。高脂飲食2周AS組內(nèi)皮細(xì)胞即明顯增大腫脹，細(xì)胞間隙變小，細(xì)胞連接處結(jié)構(gòu)變?yōu)槎骨v樣或橄欖球狀結(jié)構(gòu)，大小不一，體積增大，排列疏松。8周末時(shí)AS組內(nèi)皮細(xì)胞明顯變形，胞漿界限不清，部分細(xì)胞結(jié)構(gòu)消失；細(xì)胞排列紊亂，部分細(xì)胞融合，未融合處間隙明顯增大，內(nèi)皮細(xì)胞表面有時(shí)可見散在棉絮狀結(jié)構(gòu)；細(xì)胞連接處結(jié)構(gòu)形態(tài)不規(guī)則，大小極不一致。AT組內(nèi)皮細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)也有變化，但其變化程度明顯小于同期AS組，且其形態(tài)更接近于C組

5、。 3.C組血脂在實(shí)驗(yàn)前后無(wú)明顯變化，而AS組和AT組血漿血脂水平包括膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、在2周末時(shí)較實(shí)驗(yàn)前及C組即均已明顯升高(p＜0.05)。但同期AT組各項(xiàng)血脂水平均明顯低于AS組(均p＜0.05)， 4.實(shí)驗(yàn)前后及三組間血漿轉(zhuǎn)氨酶、磷酸肌酸激酶水平無(wú)明顯差別。 5.采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)在血清中未檢測(cè)到可溶性ICAM-1表達(dá)。 6.AS組和

6、AT組胸主動(dòng)脈ICAM-1免疫反應(yīng)陽(yáng)性范圍及程度均高于C組。AT組胸主動(dòng)脈ICAM-1免疫反應(yīng)陽(yáng)性范圍及程度均低于同期AS組。 研究結(jié)論： 1.在國(guó)際上首次應(yīng)用原子力顯微鏡觀察到，實(shí)驗(yàn)性家兔AS形成中胸主動(dòng)脈中段內(nèi)皮細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)發(fā)生了明顯變化，內(nèi)皮細(xì)胞連接處結(jié)構(gòu)的形態(tài)和排列變化隨實(shí)驗(yàn)進(jìn)程而愈加明顯，但該處結(jié)構(gòu)到底是何物質(zhì)或結(jié)構(gòu)，尚待進(jìn)一步研究。 2.ICAM-1在胸主動(dòng)脈的表達(dá)隨AS病變加重而增強(qiáng)，其參與了AS的