維胺酯及其代謝產(chǎn)物M-,1-、M-,2-體外活性研究.pdf

1、目的： 以全反式維甲酸(RA)為對(duì)照，研究維胺酯(VA)及其體內(nèi)代謝物M<,1>、M2的抗細(xì)胞增殖能力，并比較四種化合物對(duì)維甲酸類受體轉(zhuǎn)錄的激活能力，以探討它們?cè)谧饔媚Ｊ缴吓cRA的異同性，為探討VA的作用機(jī)理以及開(kāi)發(fā)新的維甲酸類藥物奠定基礎(chǔ)。 方法： 體外培養(yǎng)人宮頸癌上皮細(xì)胞HeLa細(xì)胞，采用XTT法檢測(cè)不同濃度的RA、VA、M<,1>、M<,2>對(duì)其增殖的影響。采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法分別將RARα、RARβ、RARγ

2、、RXRα受體質(zhì)粒，βRARE-tk-CAT、TREpal-tk-CAT報(bào)道質(zhì)粒和β-gal對(duì)照質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染到HeLa細(xì)胞中，在1μM的RA、VA、M<,1>、M<,2>作用HeLa細(xì)胞24小時(shí)后用CAT ELISA法檢測(cè)CAT的相對(duì)表達(dá)量以研究四種化合物對(duì)受體轉(zhuǎn)錄的激活作用。 結(jié)果： 1．抗細(xì)胞增殖能力：1μM、5μM、10μM、50μM的RA、VA對(duì)HeLa細(xì)胞增殖的抑制作用與對(duì)照組相比沒(méi)有顯著性差異，在濃度為100μ

3、M時(shí)有抑制作用(P<0.01)，RA抑制率約為37％，VA抑制率約為83％，在濃度為500μM時(shí)細(xì)胞幾乎完全死亡；1μM、5μM、10gM的M<,1>、M<,2>對(duì)HeLa細(xì)胞增殖的抑制作用與對(duì)照組相比沒(méi)有顯著性差異，在濃度為50μM時(shí)有抑制作用(P<0.05，P<0.01)，M<,1>抑制率約為29％，M<,2>抑制率約為36％，在濃度為100μM時(shí)細(xì)胞幾乎完全死亡。 2．對(duì)受體轉(zhuǎn)錄的激活能力：RA對(duì)轉(zhuǎn)染RARα、RARβ、R

4、ARγ受體質(zhì)粒的HeLa細(xì)胞引起的相對(duì)CAT表達(dá)量分別是對(duì)照組的117.7倍(p<0.01)、53.8倍(p<0.01)、44.3倍(p<0.01)；VA對(duì)轉(zhuǎn)染RARα、RARβ、RARγ受體質(zhì)粒的HeLa細(xì)胞引起的CAT的相對(duì)表達(dá)量分別是對(duì)照組的2.1倍(p<0.05)、2.1倍、1.4倍(p<0.05)；RA、VA對(duì)轉(zhuǎn)染RXRα受體質(zhì)粒的HeLa細(xì)胞均不引起相對(duì)CAT表達(dá)量的升高；M<,1>、M<,2>對(duì)轉(zhuǎn)染四種受體質(zhì)粒的HeLa細(xì)

5、胞均不引起相對(duì)CAT表達(dá)量的升高。 結(jié)論： 抗細(xì)胞增殖試驗(yàn)結(jié)果表明，上述四種化合物對(duì)HeLa細(xì)胞的抗增殖能力大小的比較順序?yàn)镸<,2>>M<,1>>VA>RA。說(shuō)明VA在體內(nèi)的抗細(xì)胞增殖能力，除了VA原藥本身的作用外，其體內(nèi)代謝產(chǎn)物M<,1>、M<,2>也參與了這一過(guò)程，而且活性比原藥更強(qiáng)。 在受體水平上，相對(duì)于RA而言，VA對(duì)RARα、RARβ、RARγ有微弱的激活作用，而M<,1>、M<,2>對(duì)RARα、RA