先天性中樞性通氣不良綜合征的臨床表型分析及分子診斷研究.pdf

1、目的：
　　CCHS的診斷標(biāo)準(zhǔn)已于1970年Mellins等人總結(jié)提出,并得到公認(rèn),且一直被沿用。目前研究表明CCHS呈常染色體顯性遺傳,其遺傳病理是定位于4p12的PHOX2B基因突變。該病是一種罕見的遺傳病,主要臨床表現(xiàn)為慢性呼吸衰竭,不伴有明顯的肺部疾病、心臟病、呼吸道畸形、膈肌抬高及神經(jīng)肌肉病變等原發(fā)性疾病,典型臨床特點(diǎn)是在清醒時(shí)有足夠的自主通氣,睡眠時(shí)常因自主通氣不足,容易導(dǎo)致高碳酸血癥,甚至伴有低氧血癥而需要機(jī)械通氣;

2、重癥CCHS的患兒無論在清醒還是睡眠時(shí)均而需機(jī)械通氣。罹患CCHS的患兒大多數(shù)為發(fā)生新突變的雜合子,大約5％的患兒父母是攜帶有PHOX2B基因突變的鑲嵌體。目前已有的研究資料表明,PHOX2B基因的多聚丙氨酸延展突變?cè)跍p數(shù)分裂期是穩(wěn)定的,親代攜帶的突變基因?qū)⒎€(wěn)定地遺傳給子代。
　　根據(jù)我院收集的CCHS患兒臨床資料發(fā)現(xiàn),患兒發(fā)病的嚴(yán)重程度及有無相應(yīng)的合并癥和基因突變的類型及臨床表型存在正相關(guān)性。本組研究為患兒的早期臨床診斷的篩選及

3、進(jìn)一步行分子遺傳學(xué)的檢查提供了幫助。同時(shí)由于不同的發(fā)病機(jī)制及突變類型,CCHS在臨床癥狀、遺傳風(fēng)險(xiǎn)和預(yù)后上均存在差異,而目前臨床常用基因序列測(cè)定和基因片段分析法進(jìn)行檢測(cè),并確定PHOX2B基因突變位點(diǎn),分析其遺傳機(jī)理、臨床特征及致病基因突變的類型,探討分子遺傳學(xué)的相關(guān)發(fā)病機(jī)制,并回顧相關(guān)性的文獻(xiàn)。
　　方法：
　　1.利用回顧性研究的方法,將2008-2013年來我院門診就診及住院的10例臨床上考慮為CCHS的新生兒的臨床表

4、型作為研究對(duì)象,根據(jù)Mellins等所提出并總結(jié)的主次要臨床標(biāo)準(zhǔn)作為參考,進(jìn)而總結(jié)分析我國CCHS新生兒期的典型臨床特征。
　　2.留取患兒的外周血,提取 DNA,采用甲基化特異性PCR擴(kuò)增PHOX2B基因1-3外顯子,將其產(chǎn)物進(jìn)行基因序列檢測(cè)分析。
　　結(jié)果：
　　10例患兒均存在以下臨床特征:在睡眠期均表現(xiàn)通氣不足且需要機(jī)械通氣,檢測(cè)血?dú)馓崾揪懈咛妓嵫Y,睡眠時(shí)CO2分壓持續(xù)高于60mmHg。10例患兒分別

5、>　　行分子遺傳學(xué)檢測(cè),證實(shí)其致病基因?yàn)镻HOX2B,結(jié)合相關(guān)的文獻(xiàn),均可確診為CCHS。PHOX2B基因測(cè)序分析發(fā)現(xiàn)10例患兒的致病基因PHOX2B第3外顯子DNA拷貝數(shù)變異導(dǎo)致丙氨酸呈不同數(shù)目的增加。
　　結(jié)論：
　　1.患兒清醒時(shí)通氣正常,睡眠時(shí)呼吸淺慢,且合并高碳酸血癥是CCHS的主要臨床表現(xiàn),需要呼吸機(jī)輔助支持。
　　2.PHOX2B基因第3外顯子中編碼丙氨酸的重復(fù)序列發(fā)生擴(kuò)展突變,是10例患兒的遺傳病理發(fā)病