狼毒大戟抗腫瘤活性成分的提取分離及結(jié)構(gòu)鑒定.pdf

1、狼毒大戟(Euphorbia fischeriana),系大戟科狼毒屬,多年生草本植物。近年來有文獻(xiàn)報(bào)道,狼毒大戟提取物有較強(qiáng)的抗腫瘤作用。為了明確狼毒大戟的抗腫瘤活性成分,并從中尋找具有抗腫瘤作用的天然活性化合物,本研究對(duì)狼毒大戟中抗腫瘤組分進(jìn)行提取分離,并通過理化方法及光譜分析最終確定各化合物的結(jié)構(gòu)。本論文對(duì)狼毒大戟根進(jìn)行了系統(tǒng)的預(yù)試,結(jié)果表明狼毒大戟根中主要含有甾體,萜類,黃酮,內(nèi)脂,香豆素,皂苷等化學(xué)成分。通過單因素實(shí)驗(yàn),最終選

2、定參數(shù)為：料液比1：6,在85℃水浴加熱回流提取4h。在此工藝參數(shù)下,采用系統(tǒng)溶劑法分離得到95%乙醇浸膏,70%乙醇浸膏和水提物。將其中的95%乙醇浸膏用不同極性的溶劑粗分成四個(gè)部位：石油醚,乙酸乙酯,丙酮,甲醇。通過CCK-8 (Cell Counting Kit-8)法對(duì)以上部位進(jìn)行抗腫瘤活性的篩選,結(jié)果發(fā)現(xiàn)石油醚部位和乙酸乙酯部位有較強(qiáng)的抑制作用,在測定濃度范圍內(nèi)表現(xiàn)出良好的濃度依賴作用。當(dāng)濃度為100μg/ml時(shí),石油醚部位和

3、乙酸乙酯部位對(duì)SGC-7901、HT-29、HeLa三種腫瘤細(xì)胞的抑制率分別達(dá)到56.48%,52.61%,45.37%和52.19%,48.73%,50.12%。之后對(duì)有較強(qiáng)抗腫瘤活性的乙酸乙酯部位采用反復(fù)硅膠柱層析結(jié)合重結(jié)晶方法分離純化得到單體化合物X-1和化合物X-2。利用化學(xué)方法和波譜技術(shù)鑒定出X-1的結(jié)構(gòu)為甾體類化合物β-谷甾醇,X-2為三萜類化合物羽扇豆醇。最后對(duì)以上兩個(gè)化合物進(jìn)行體外抗腫瘤活性的測定,結(jié)果表明這兩個(gè)化合物對(duì)