JNK信號(hào)通路在小鼠TNBS結(jié)腸炎中的作用研究.pdf

1、目的：建立小鼠TNBS結(jié)腸炎模型，檢測(cè)MPO活性、TNF-α水平、p-JNK表達(dá)及結(jié)腸上皮細(xì)胞凋亡程度。利用INK阻斷劑SP600125及益生菌VSL＃3干預(yù)TNBS結(jié)腸炎，探討JNK通路在小鼠TNBS結(jié)腸炎中的作用。 方法：取BALB/c小鼠，隨機(jī)分成對(duì)照組、TNBS結(jié)腸炎組、SP600125組、VSL＃3組，以2.5mg TNBS50％G醇溶液灌腸造模，SP600125組在灌腸前30min，灌腸后24、48、72小時(shí)腹腔注射

2、SP600125(30mg/Kg)，VSL＃3組于灌腸前2曰開始管喂VSL＃3(2mg/d)共5天，每日行DAI評(píng)分。灌腸后第3天處死小鼠，結(jié)腸大體評(píng)分、組織學(xué)評(píng)分，比色法測(cè)定結(jié)腸勻漿液中MPO活性，ELISA測(cè)定結(jié)腸組織中TNF-α的含量，免疫組化法測(cè)定結(jié)腸組織中p-INK表達(dá)，TUNEL檢測(cè)結(jié)腸上皮細(xì)胞凋亡指數(shù)(AI)。 結(jié)果： 1.DAI評(píng)分：TNBS結(jié)腸炎組小鼠自灌腸之日起增高，且明顯高于正常對(duì)照組，SP6001

3、25組及VSL＃3組評(píng)分值低于TNBS結(jié)腸炎組； 2.大體評(píng)分：TNBS結(jié)腸炎組(5.00±2.27)高于對(duì)照組(0.50±0.53)(p<0.05)，SP600125組(2.13±1.25)與VSL＃3組(2.50±1.41)均低于TNBS結(jié)腸炎組(p<0.05)，VSL＃3組與SP600125組無(wú)差異(p>0.05)； 3.組織學(xué)評(píng)分：TNBS結(jié)腸炎組(3.13±0.83)高于對(duì)照組(0.63±0.52)(p<0.0

4、5)，SP600125組(1.38±0.52)與VSL＃3組(1.88±0.64)均低于TNBS結(jié)腸炎組(p<0.05)，VSL＃3組與SP600125組無(wú)差異(p>0.05)； 4.MPO活性：TNBS結(jié)腸炎組(4.31±0.69u/g)高于對(duì)照組(1.75±0.21u/g)(p<0.05)，SP600125組(1.75±0.21u/g)與VSL＃3組(3.86±0.29 u/g)均低于TNBS結(jié)腸炎組(p<0.05)，VSL

5、＃3組較SP600125組高(p<0.05)； 5.結(jié)腸勻漿TNF-α濃度：TNBS結(jié)腸炎組(211.11±46.73pg/mg)高于對(duì)照組(90.60±24.25pg/mg)(p<0.05)，SP600125組(149.74±41.34pg/mg)低于TNBS結(jié)腸炎組(p<0.05)，VSL＃3組(187.53±30.64pg/mg)與TNBS結(jié)腸炎組無(wú)差異(p>0.05)，而與SP600125組無(wú)明顯差異(p=0.05)；

6、 6.p-JNK的IOD值：TNBS結(jié)腸炎組(28.06±2.15)較對(duì)照組(6.83±1.28)顯著增高(p<0.01)，SP600125組(13.27±1.47)明顯低于TNBS結(jié)腸炎組及VSL＃3組(p<0.01)，VSL＃3組(26.32±2.53)與TNBS結(jié)腸炎組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p>0.05)； 7.結(jié)腸上皮細(xì)胞AI：TNBS結(jié)腸炎組(16.75±1.98)高于對(duì)照組(3.38±0.92)(p<0.05)，SP6

7、00125組(8.88±2.36)及VSL＃3組(13.75±2.71)均LLTNBS結(jié)腸炎組低(p<0.05)，VSL＃3組較SP600125組高(p<0.05)； 8.相關(guān)性分析：小鼠結(jié)腸勻漿MPO活性與p-JNK的表達(dá)正相關(guān)(r=0.738，p<0.05)，TNF-α含量與P—YNK的表達(dá)正相關(guān)(r=0.738，p<0.05)，結(jié)腸上皮細(xì)胞AI與P-JNK的表達(dá)正相關(guān)(r=0.788，p<0.05)。 結(jié)論：JNK