細(xì)胞因子與Graves病發(fā)病機(jī)制關(guān)系的研究.pdf

1、目的 研究Graves病(GD)患者血清中細(xì)胞因子的變化及其對GD患者甲狀腺細(xì)胞凋亡的影響，從而探討細(xì)胞因子、細(xì)胞凋亡與GD發(fā)病機(jī)制的內(nèi)在聯(lián)系，為臨床GD的治療提供理論依據(jù)。 方法 1．采用ELISA法測定40例GD未治療組患者和40例臨床緩解組病人血清中IL-6、TNF-α和IFN-γ的水平，同時用化學(xué)發(fā)光免疫分析法測定各組的FT<,3>、FT<,4>和TSH的水平，39例健康體檢者同樣檢測上述項目作為對照組。

2、2．取5例GD患者甲狀腺組織，采用原代細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、MTT比色法和流式細(xì)胞術(shù)檢測1-100U/ml濃度范圍內(nèi)IFN-γ，和TNF-α對甲狀腺細(xì)胞增殖活力、細(xì)胞凋亡率以及Fas蛋白表達(dá)率的影響，應(yīng)用ELISA檢測1-100U/ml濃度范圍內(nèi)IFN-γ和TNF-α刺激甲狀腺細(xì)胞后培養(yǎng)上清液中sFas含量的變化。 結(jié)果 1．GD未治療組患者血清中TNF-α。IFN-γ和IL-6的水平均明顯高于對照組(P<0.01)。緩解組患

3、者血清中TNF-α和IFN-γ的水平與未治療組的相比降低均不明顯(P>0.05)，且均明顯高于對照組(P<0.01)；緩解組患者血清中IL-6的水平與未治療組的相比明顯降低(p<0.01)，且與對照組相比沒有明顯變化(P>0.05)。2．GD未治療組患者血清中TNF-α、IFN-γ和IL-6的水平與FT<,3>、FT<,4>和TSH的水平相關(guān)性均沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。3．1-100U/ml濃度范圍內(nèi)IFN-γ和TNF-α刺激甲

4、狀腺細(xì)胞72h后，與對照組(0U/ml細(xì)胞因子)相比，甲狀腺細(xì)胞增殖活力均明顯降低(除1u/ml的IFN-γ外其余P<0.05)，甲狀腺細(xì)胞的凋亡率、Fas蛋白表達(dá)率以及培養(yǎng)上清液中sFas含量均明顯增加(除1U/ml IFN-或/和1U/ml TNF-α外其余P<0.05)。同時100U/ml IFN-y/TNF-α聯(lián)合作用組與單獨100U/ml IFN-γ和100U/mlTNF-α組相比增殖活力均明顯降低(P<0.01)，甲狀腺細(xì)胞

5、的凋亡率、Fas蛋白表達(dá)率以及培養(yǎng)上清液中sFas含量均明顯增加(P<0.01)。4.1-100U/ml濃度范圍內(nèi)IFN-γ和TNF-α誘導(dǎo)的凋亡率與Fas蛋白表達(dá)率的相關(guān)性均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。 結(jié)論 1．GD患者血清中存在TNF-α、IFN吖和IL-6的變化，它們可能共同參與GD的發(fā)病過程，但是TNF-α、IFN-γ和IL-6的水平不能很好的反映GD病情的嚴(yán)重程度。 2．一定濃度范圍內(nèi)的IFN-