糖尿病大鼠腎組織中MMP-2和MMP-9的表達及腺相關病毒介導血管抑素的干預研究.pdf

1、目的:
　　 (1)觀察基質金屬蛋白酶-2(MMP-2)和基質金屬蛋白酶-9(MMP-9)在糖尿病大鼠腎組織中的表達情況;
　　 (2)探討腺相關病毒介導血管抑素(recombinant adeno-associated virus carrying human angiostatin gene,rAAV-AS)對糖尿病腎病大鼠腎皮質中MMP-2和MMP-9表達的影響及可能機制。
　　 方法:采用鏈脲佐菌素(ST

2、Z)60mg/kg腹腔注射法建立糖尿病動物模型。清潔級SD(Sprague-Dawley)雄性大鼠隨機分為正常組(NC組,n=10),糖尿病腎病組(DN組,n=15),腺相關病毒空載體組(rAAV-0組,2×1012VG/kg BW,n=15),腺相關病毒介導血管抑素組(rAAV-AS組,2×1012VG/kg BW,n=15);第10周檢測大鼠的微量白蛋白尿及腎臟肥大指數、腎功能、血糖、糖化血紅蛋白;免疫印跡法檢測腎組織中血管抑素的表

3、達,免疫組化法觀察腎皮質內MMP-2、MMP-9表達的變化,光鏡觀察腎組織病理變化。
　　 結果:
　　 (1)免疫印跡法結果:與NC組比較,DN組及rAAV-0組AS表達均減少,rAAV-AS組大鼠腎組織中AS表達明顯增多,差異有統計學意義(P＜0.05);
　　 (2)生化指標結果:與NC組比較,rAAV-AS組、DN組及rAAV-0組BG、HbA1c、SCr、MAU、BUN均明顯升高(P＜0.05);rAA

4、V-AS組SCr、MAU、BUN較DN組及rAAV-0組降低(P＜0.05),但各組間BG、HbA1c差異無統計學意義(P＞0.05)。DN組與rAAV-0組各指標間差異無統計學意義(P＞0.05)。
　　 (3)免疫組化結果:NC組中MMP-2、MMP-9在腎小球及腎小管中均有微量表達,DN組及rAAV-0組的表達則明顯減弱,差異有統計學意義(P＜0.05),且主要在腎小球系膜細胞及腎小管上皮細胞,而rAAV-AS組的表達較D

5、N組及rAAV-0組增強,差異有統計學意義(P＜0.05)。
　　 結論:
　　 (1)通過腺相關病毒載體介導,血管抑素可以在腎組織中持續(xù)較高水平的表達;
　　 (2)糖尿病大鼠腎組織中MMP-2和MMP-9的表達水平明顯減少;
　　 (3)rAAV-AS對糖尿病大鼠腎臟具有保護作用,其機制可能是通過增加糖尿病大鼠腎組織中MMP-2和MMP-9的表達,從而減少腎組織細胞外基質(ECM)的積聚有關,且這種保