霉酚酸酯對(duì)糖尿病腎病大鼠腎組織IGF-1、MMP-2表達(dá)的影響.pdf

1、背景與目的：
　　 隨著許多發(fā)展中國家生活方式和飲食習(xí)慣的改變,糖尿病的發(fā)病率也日趨升高,糖尿病腎臟疾病(diabetic kidney disease,DKD)是糖尿病的主要微血管并發(fā)癥,正成為發(fā)展中國家慢性腎臟病的最主要原因。糖尿病腎臟疾病早期表現(xiàn)為腎小球高灌注、高濾過,主要組織學(xué)改變是系膜區(qū)擴(kuò)張。其確切的發(fā)病機(jī)制目前尚未完全闡明,以往將其歸因于血流動(dòng)力學(xué)和代謝異常及其相互作用,目前研究表明,糖尿病腎臟疾病是由包括遺傳和環(huán)境

2、在內(nèi)的多因素相互作用引發(fā)的一系列復(fù)雜的病理生理變化結(jié)果。近年,越來越多的研究發(fā)現(xiàn)細(xì)胞因子介導(dǎo)的炎癥機(jī)制是DKD發(fā)生發(fā)展的重要環(huán)節(jié)。通過干預(yù)炎癥機(jī)制治療糖尿病腎臟疾病成為目前研究的熱點(diǎn)。
　　 基礎(chǔ)研究證實(shí)發(fā)生糖尿病腎臟疾病時(shí)腎臟局部胰島素樣生長因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)積聚和基質(zhì)金屬蛋白酶-2(matrixmetalloproteinase-2,MMP-2)活性降低在腎小球系

3、膜基質(zhì)合成與降解失衡過程中起重要作用。本研究旨在以一種新型免疫抑制劑霉酚酸酯(Mycophenolatemofetil,MMF)干預(yù)鏈脲佐菌素誘導(dǎo)的糖尿病腎臟疾病大鼠模型,觀察IGF-1、MMP-2在糖尿病腎臟疾病大鼠腎組織的表達(dá)變化,探討MMF對(duì)糖尿病腎臟疾病大鼠腎臟的保護(hù)作用及可能存在的機(jī)制。
　　 方法：
　　 1雄性SD大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后,隨機(jī)分為對(duì)照組(C組)和模型組,模型組經(jīng)鏈脲佐菌素誘導(dǎo)糖尿病大鼠模型成功

4、后,隨機(jī)分為糖尿病組(DM組)和MMF治療組(MMF組)。MMF組予MMF15mg/kg灌胃,對(duì)照組和糖尿病組按體質(zhì)量予相當(dāng)量溶媒灌胃。于8周末檢測(cè)24小時(shí)尿蛋白量、血糖、內(nèi)生肌酐清除率(Ccr)、相對(duì)腎質(zhì)量(左腎質(zhì)量KW/體質(zhì)量BW);
　　 2腎組織切片,HE染色、PAS染色艦察腎臟病理改變;免疫組化、Western印跡檢測(cè)腎臟IGF-1、MMP-2的表達(dá)。
　　 3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處

5、理,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以-x±s表示,組問比較,采用單因素方差分析,多重比較采用Bonferroni法,相關(guān)分析采用pearson相關(guān)分析法,檢驗(yàn)水準(zhǔn)a=0.05。
　　 結(jié)果：
　　 1與C組比較,DM組和MMF組相對(duì)腎質(zhì)量、血糖、24h尿蛋白量、Ccr均明顯升高(P＜0.01);與DM組比較,MMF組相對(duì)腎質(zhì)量、24h尿蛋白量、Ccr均下降(P＜O.05),DM組與MMF組血糖差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 2腎臟病理形態(tài)及

6、免疫組化:腎組織HE染色顯示,與C組比較,DM組腎小球體積增大,系膜區(qū)細(xì)胞數(shù)增加,MMF組較DM組有所減少。PAS染色顯示,與C組比較DM組、MMF組。腎小球體積增大,系膜區(qū)基質(zhì)明顯增生,腎小球毛細(xì)血管袢受壓,基底膜增厚,MMF組較DM組有所改善。IGF-1、MMP-2免疫組化SP法顯示在腎小球系膜區(qū)、基底膜及腎小管基底膜均有表達(dá)。IGF-1在DM組、MMF組表達(dá)較C組明顯增加(P＜0.01),MMF組較DM組下降(P＜0.01);MM

7、P-2在DM組表達(dá)較C組下降(P＜0.01),MMF組較DM組增加(P＜0.01)。
　　 3腎組織IGF-1、MMP-2的Western印跡表達(dá):Western印跡表明,IGF-1在DM組表達(dá)較C組增加,MMF組較DM組下降;MMP-2在DM組較C組下降,MMF組較DM組增加。
　　 4相關(guān)分析顯示24h尿蛋白量與檢測(cè)到的IGF-1相對(duì)表達(dá)量呈正相關(guān)(r=0.743,P＜0.01),而與MMP-2相對(duì)表達(dá)量呈負(fù)相關(guān),(