CAGE基因在顱腦腫瘤中的表達(dá)及其機(jī)制的研究.pdf

1、原發(fā)腦腫瘤以膠質(zhì)瘤為最多，約占35.26％-60.96％，是顱內(nèi)的惡性腫瘤，手術(shù)切除難度大，易于復(fù)發(fā)，化學(xué)藥物治療不易透過(guò)血腦屏障，對(duì)放射線不太敏感，并且發(fā)病率有明顯上升趨勢(shì)，因此迫切要求尋找新的診斷和治療手段，腫瘤免疫治療亦是這些新的診斷和治療手段之一。 腫瘤特異性抗原的獲得是研制腫瘤免疫治療的特異性疫苗的前提。癌-睪丸抗原(cancertestisantigen，CTA)家族成員具有—共同的特性，即只表達(dá)于睪丸組織和一些腫瘤

2、組織，在其他正常組織不表達(dá)，由于睪丸組織缺乏人類白細(xì)胞抗原(humanleucocyteantigen，HLA)分子，其所表達(dá)的CTA不引起機(jī)體免疫反應(yīng)，而表達(dá)于腫瘤組織的CTA，能在患者體內(nèi)誘導(dǎo)特異性的免疫應(yīng)答，因此CTA被認(rèn)為是腫瘤免疫治療的理想抗原，它已成為研制腫瘤疫苗的首選抗原成分。CT抗原在腫瘤中的表達(dá)具有異質(zhì)性，故而確定不同類型腫瘤中特異性CT抗原的表達(dá)特點(diǎn)，可以幫助我們研制針對(duì)不同腫瘤的疫苗。 表觀遺傳是指DNA序

3、列不發(fā)生變化但基因表達(dá)卻發(fā)生了可遺傳的改變。其中對(duì)DNA甲基化的研究最為透徹、最為深入。脊椎動(dòng)物基因組中基因5’端的CpG島甲基化狀態(tài)能夠調(diào)控基因的表達(dá)，幾乎所有的看家基因和近一半的組織特異性表達(dá)基因的表達(dá)受CpG島甲基化調(diào)控。目前認(rèn)為DNA甲基化是基因表達(dá)調(diào)控的重要機(jī)制之一。DNA甲基化對(duì)CTA表達(dá)的調(diào)節(jié)目前已有不少實(shí)驗(yàn)證明，DNA甲基化在部分CTA的表達(dá)調(diào)控中起重要作用，CTA基因啟動(dòng)子區(qū)域的甲基化狀態(tài)影響其表達(dá)。 腫瘤相關(guān)

4、基因(cancerassociatedgene，CAGE)是2002年Cho等人采用重組克隆表達(dá)抗原的血清學(xué)分析技術(shù)(SEREX)，篩查睪丸組織cDNA文庫(kù)時(shí)發(fā)現(xiàn)的一個(gè)新的癌-睪丸抗原編碼基因，它定位于Xp22，它在胃癌組織中的表達(dá)率高達(dá)89％(17/19)，在宮頸癌、肝癌、肺癌、腎癌細(xì)胞系中表達(dá)率分別為100％、80％(8/10)、50％和40％。但在白血病、骨髓性白血病、胰腺癌、乳腺癌、前列腺癌和黑色素瘤細(xì)胞系中不表達(dá)。然而，顱腦腫

5、瘤中該基因的表達(dá)情況迄今未見(jiàn)報(bào)道，本實(shí)驗(yàn)采用RT-PCR，半定量RT-PCR方法，檢測(cè)CAGE在不同正常組織及腦腫瘤中的表達(dá)情況，以揭示該基因在腦腫瘤發(fā)病中的作用；采用甲基化特異性PCR方法，檢測(cè)腦腫瘤組織CAGE基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化情況，以揭示其與基因表達(dá)的相關(guān)性；采用Western印跡雜交方法，檢測(cè)血清中CAGE抗體，以探討CAGE用作血清學(xué)篩查指標(biāo)的可行性。 通過(guò)研究得出結(jié)論： 1.CAGE是癌/睪丸抗原，僅表達(dá)在睪