探討抗氧化劑對(duì)人血管內(nèi)皮細(xì)胞炎癥反應(yīng)的干預(yù)作用.pdf

1、目的：
　　通過脂多糖誘導(dǎo)人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生炎癥反應(yīng)模擬ALI時(shí)肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞的炎癥反應(yīng)，并早期加入抗氧化劑對(duì)其進(jìn)行干預(yù)，探討抗氧化劑對(duì)ALI的干預(yù)作用，旨在從抗氧化藥物途徑上為治療ALI提供基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：
　　以人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞為研究對(duì)象，給予脂多糖誘導(dǎo)其產(chǎn)生炎癥反應(yīng)，加入抗氧化劑對(duì)其進(jìn)行干預(yù)。實(shí)驗(yàn)分成4組，A組：正常對(duì)照組；B組：內(nèi)毒素模型組（LPS組）；C組：還原型谷胱甘肽干預(yù)組（GSH組

2、）；D組：依達(dá)拉奉干預(yù)組。分三個(gè)時(shí)間觀察點(diǎn)2小時(shí)、6小時(shí)、12小時(shí)，每個(gè)階段設(shè)6個(gè)孔。通過倒置顯微鏡觀察細(xì)胞的形態(tài)及生長(zhǎng)情況；采用酶免疫法（ELISA）測(cè)細(xì)胞上清液腫瘤壞死因子（TNF-α）、白細(xì)胞介素-8（IL-8）、8-異前列腺素（8-isoprostane）；DAPI染色觀察細(xì)胞凋亡形態(tài)；細(xì)胞凋亡率采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)。然后對(duì)各指標(biāo)測(cè)得值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　結(jié)果：
　　1 LPS組測(cè)定8-isoprostane各個(gè)時(shí)間

3、點(diǎn)的含量較正常對(duì)照組增高（P＜0.01），干預(yù)組各個(gè)時(shí)間觀察點(diǎn)8-isoprostane含量較LPS組低（P＜0.01）；但較正常組偏高（P＜0.01）；
　　2 LPS組測(cè)定各個(gè)時(shí)間點(diǎn)TNF-α、IL-8濃度較正常對(duì)照組增加（P＜0.01），干預(yù)組各個(gè)時(shí)間觀察點(diǎn)TNF-α、IL-8濃度較LPS模型組低（P＜0.01），但較正常組偏高（P＜0.01）；
　　38-isoprostane濃度與血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡率、炎癥因子以及炎

4、癥因子相互之間存在明確的線性關(guān)系；
　　4脂多糖誘導(dǎo)人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞可見凋亡細(xì)胞；流式細(xì)胞儀(PI染色)揭示凋亡峰，LPS組的凋亡率較正常對(duì)照組增加（P＜0.01），干預(yù)組各個(gè)時(shí)間觀察點(diǎn)凋亡率較LPS組低（P＜0.01），但較正常組偏高（P＜0.05）。
　　結(jié)論：
　　1本研究成功誘導(dǎo)了體外細(xì)胞產(chǎn)生炎癥反應(yīng)，為以后對(duì)ALI的進(jìn)一步研究提供了幫助；
　　2 LPS可以誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡；肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡